[发明专利]2-N[7-硝基苯-2-乙二酸,3-4羟氨基]-2-脱氧葡萄糖的合成方法

说明书

技术领域

本发明涉及2-NBDG的合成方法，即2-N[7-硝基苯-2-乙二酸,3-4羟氨基]-2-脱氧葡萄糖的合成。

背景技术

2-NBDG，即2-N[7-硝基苯-2-乙二酸,3-4羟氨基]-2-脱氧葡萄糖，是2-脱氧葡萄糖(2-DG)荧光类似物，是一种常用的生化荧光试剂，目前多将其应用于疾病检测中的光学成像技术，特别是用于对肿瘤的检测（胡慧，等，江苏大学学报（医学版），2010年20卷3期，p216~219）。该化合物在成像技术方面具有优异效果，但其市面售价较高，约为5mg/2000元，目前还无法大量投入使用。

2-NBDG的制备方法，是导致其高售价的主要原因。目前报道的2-NBDG的合成方法，主要分为两种：

方法一、通过NBD-Cl和GlcN反应来合成2-NBDG

2007年Yamada,K.报道了的合成2-NBDG的方法，这是目前报道的通过NBD-Cl来合成2-NBDG较为理想的方法。其合成步骤如下：

该方法收率仅有12%，收率较低导致了2-NBDG的高售价。（Yamada,K.;Saito,M.;Matsuoka,H.;Inagaki,N.Nat.Protoc.2007,2,753–762.）

方法二、通过NBD-F和GlcN反应来合成2-NBDG

2011年在Jung,M.E.报道的文章中[Tetrahedron Letters52(2011)2533-2535]，首次利用NBD-F来合成2-NBDG，其收率有了明显的提高，其合成方法为：

（一）、

将NBD-F(48.7mg,0.266mmol,1.1equiv)和氨基葡萄糖盐酸盐（52.4mg 0.243mmol,1.0 equiv)加入到1mL乙腈中，然后加入0.3M NaHCO₃(0.315mmol,1.2equiv)溶液1ml，然后在黑暗的环境下将混合液在23°C条件下搅拌28h后溶液变为了红黑色/黑色。待反应结束后用硅藻土过滤，用甲醇洗，滤液旋干、用硅胶柱层析，最后得到红色粉末状产物(62mg,75%)。

（二）、

将NBD-F(52.1mg,0.285mmol,1.0equiv)和氨基葡萄糖盐酸盐(64.5mg,0.299mmol,1.1equiv)加入到圆底烧瓶中，然后加入0.5mL DMF和三乙胺(0.08mL,0.569mmol,2.0equiv)。然后在黑暗的环境下将混合液在23°C条件下搅拌28h，待反应结束后将混合物真空浓缩，用硅胶柱层析，最后得到红色粉末状产物(63.2mg,65%)。

该方法中，采用NBD-F为原料进行合成，2-NBDG的收率可高达65%-75%，显著提高了产品收率。然而，该方法中使用的NBD-F，其价格昂贵，其市场售价大约是NBD-Cl的100倍以上，使得该方法的制备成本显著提高，这也是导致2-NBDG昂贵的另一个原因；同时，NBD-F见光容易分解，不容易保存，最好是现制现用，而且反应要在避光的条件下进行，不便于工业化大生产。

因此，寻求一条更加经济、简便、高效的方法来合成2-NBDG仍然具有其研究价值。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的2-N[7-硝基苯-2-乙二酸,3-4羟氨基]-2-脱氧葡萄糖的合成方法。

本发明提供了2-NBDG的合成方法，其操作步骤如下：

取氨基葡萄糖盐酸盐、碱、4-氯-7-硝基苯呋咱，在反应溶剂中，20-60℃下反应15-20h，待反应结束后，除去溶剂，经硅胶柱层析，即得目标产物；

所述反应溶剂为DMF、甲醇、含水甲醇、乙醇、甲苯中的一种或两种以上的混合溶剂；所述碱为碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸钾或三乙胺。

反应式如下：

进一步地，所述反应溶剂为DMF、甲醇或浓度大于40%v/v的含水甲醇。

进一步优选地，所述反应溶剂为甲醇。

进一步优选地，所述碱为三乙胺。

进一步地，反应温度为28-32℃。

进一步优选地，反应温度为30℃。

进一步地，反应时间为15-20h。

进一步优选地，反应时间为15-16h。

其中，碱与4-氯-7-硝基苯呋咱的摩尔比为（2.2-3.5）：1。

进一步地，碱与4-氯-7-硝基苯呋咱的摩尔比为3：1。