[发明专利]一种酶解玉米蛋白制备玉米低聚肽螯合物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物酶工程技术领域，具体涉及一种酶解玉米蛋白制备玉米低聚肽螯合物的方法。

背景技术

随着生物技术进步和生命科学的发展，生物体内的活性多肽受到越来越多的关注，尤其是随着许多活性肽生理功能和结构的明朗化，更推动了科学界对活性多肽其功能性延伸性的研究，其中第三代营养添加剂多肽螯合物为目前研究的热点之一。肽是具有活性的小分子蛋白物质，大体可以分为三类，即内源肽、合成肽和酶解肽，肽的功能性及生理活性与其分子量大小及氨基酸链长短密切相关。根据现有国内外发表的文献资料，玉米蛋白的分子量非常大，80%的蛋白质分子量在十万道尔顿以上，而通过酶解制备的玉米低聚肽，其分子量在1000道尔顿以下。玉米低聚肽由于其分子量小，因此在营养及其生理活性方面功能性突出，利用其在人体内容易被吸收利用的特点，将玉米低聚肽和微量元素相螯合，其金属离子与多肽分子通过配位键结合后，生成稳定的螯合物，不仅稳定性好，缓解了矿物质之间的颉抗作用，而且在消化过程中减少了pH值、脂类、纤维、胃酸等物质的影响，有利于人体对金属离子的充分吸收和利用。

此外由于玉米蛋白的颜色呈黄色或者淡黄色，需要对其进行脱色处理，现有技术一般采用活性肽脱色或者离子交换树脂脱色，前者氮损耗率在30%左右，产率不高；后者需要对离子交换树脂经行洗脱和再生，工艺复杂，成本较高。

本发明旨在以食品级玉米蛋白粉为原料，先后通过多种酶酶解玉米蛋白及新型脱色工艺，制备出高纯度的玉米低聚肽原料，其90%以上的蛋白分子量在1000道尔顿以下。再通过螯合反应将该玉米低聚肽与微量元素进行螯合，制成玉米低聚肽螯合物，作为一种新的食品和保健品。

发明内容

本发明的目的是由以下技术方案实现的：

一种酶解玉米蛋白制备玉米低聚肽螯合物的方法，按重量百分比，包括以下步骤：

（1）将重量为100份的玉米蛋白配置成重量浓度为7～15%的水溶液作为底物，调节PH值至8.5～9.5，温度至55～70℃，加入碱性蛋白酶酶解，酶解过程中不断加入NaOH溶液来维持PH值，酶解结束后用HCl溶液调节PH值至5～7，加入中性蛋白酶酶解，制得玉米低聚肽水解液；

（2）将所述玉米低聚肽水解液用复合风味蛋白酶酶解，控制条件为所述复合风味蛋白酶的含量为所述玉米蛋白重量的0.2%～0.8%，酶解反应温度为50℃～70℃，酶解反应时间为3～5小时；

（3）用食品级双氧水进行脱色处理，控制条件为所述双氧水含量为所述玉米蛋白重量的10%～30%，温度60℃～80℃，pH7～9，脱色时间1～3小时；

（4）用食品级过氧化氢酶进行酶解，控制条件为所述食品级过氧化氢酶含量为所述玉米蛋白重量的0.04%～0.06%，酶解温度为40℃～60℃，酶解时间为1～2小时；酶解结束后，加热至85℃～95℃，灭酶15-20分钟；

（5）加入微量元素进行螯合反应，控制所述螯合反应条件为所述微量元素含量为所述玉米蛋白重量的0.1%～0.3%，温度60℃～70℃，pH为8～9，反应时间为1～2小时；

（6）离心，喷雾冷冻干燥。

进一步，所述碱性蛋白酶酶解条件为：所述底物重量浓度为11%～15%，所述碱性蛋白酶酶用量为所述玉米蛋白重量的0.3%～0.5%，温度为62～68℃，PH8.5～9.5，酶解时间3～4小时；所述中性蛋白酶酶解条件为：所述底物重量浓度为11%～15%，所述中性蛋白酶酶用量为所述玉米蛋白重量的0.3%～0.5%，温度为40～50℃，PH 5～7，酶解时间0.5～1小时。

进一步，所述碱性蛋白酶酶解条件为：所述底物重量浓度7%～10%，所述碱性蛋白酶酶用量为所述玉米蛋白重量的0.3%～0.5%，温度为62～68℃，PH8.5～9.5，酶解时间3～4小时；所述中性蛋白酶酶解条件为所述底物重量浓度为7%～10％，所述中性蛋白酶酶用量为所述玉米蛋白重量的0.3%～0.5%，温度为40～50℃，PH 5～7，酶解时间0.5～1小时。

进一步，所述碱性蛋白酶的酶活力200000U/g，所述中性蛋白酶的酶活力200000U/g，所述风味蛋白酶的酶活力200000U/g，所述食品级过氧化氢酶酶活力800000U/g，所述NaOH溶液质量分数为1％，所述HCl溶液质量分数为1%。