[发明专利]沼泽红假单胞菌菌株及应用、菌剂药剂及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于生物农药技术领域，尤其涉及一种沼泽红假单胞菌菌株及其药剂在防治水稻病害中的应用。

背景技术

水稻是我国主要的粮食作物之一，然而水稻病害的持续发生一直影响着水稻生产。稻曲病是水稻主要的病害之一，在世界水稻产区广泛分布并且有逐年加重的趋势，由稻曲病引起的水稻病害每年可造成上亿元的直接经济损失，因此，研究和防治水稻稻曲病刻不容缓。

目前，稻曲病的防治主要是采用化学农药防治的方法。化学农药虽具有应用方便、防效较高的优点，但化学农药的过度使用将会产生以下问题：

①研制新品种化学抗菌药难度加大，费用提高；

②抗药性问题越来越严重：由于化学杀菌剂的长期使用，使得植物病原菌普遍出现了较高水平的抗药性，其中最常见的是植物病原真菌对杀菌剂的抗药性；抗药性的产生往往导致植物病害的化学防治失败，并且还会给以后的防治带来连锁反应，同时给农业生产带来巨大的损失；

③生态污染：化学杀菌剂对野生和非靶标生物有毒，环境相容性差，使用甚至滥用化学杀菌剂，将导致大量化学农药流失到生态环境中，对生态系统造成严重的危害；同时，化学农药不易降解，高残留，对人畜极不安全，这些都严重限制了其在将来农业生产上的应用。

因此，在推行无公害农药和可持续农业生产的今天，开发研制不易产生抗性、环境相容性较好的生物农药已成为当今农药发展的必然趋势。

发明内容

本发明针对目前农业生产中稻曲病防治难度大、成本高、农药残留、化学抗药性日益突出等问题，目的是要克服现有技术的不足，提供一种生产成本低、无毒、绿色环保、使用方便的沼泽红假单胞菌菌株及其制备的相应菌剂、药剂，并同时提供相应菌剂、药剂的制备方法和应用，该应用可防治水稻稻曲病、提高水稻的抗病性。

为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为一株沼泽红假单胞菌菌株，所述沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)菌株的名称为沼泽红假单胞菌CS-1(即Rhodopseudomonas palustris CS-1)，具体为一株光合细菌(Photosynthetic Bacterium)菌株，其在中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)的保藏编号为CCTCC No：M 2012224，保藏单位地址位于中国武汉大学，保藏日期为2012年6月12日。

本发明的上述菌株经菌落和形态观察、染色反应、常规生理生化特征实验以及16S rDNA序列分析，鉴定为是沼泽红假单胞菌属中的光合细菌菌株，上述本发明的光合细菌菌株具有以下主要特征：

①在表观形态上，菌落表面光滑，成规则圆形，红色，湿润易挑起；②在生理生化特性上，淀粉水解试验反应阳性，过氧化氢酶试验反应阳性，柠檬酸盐试验反应阳性，G-，V-P反应阴性，甲基红试验反应阴性，吲哚试验反应阴性，脲酶试验反应阴性，革兰氏染色反应阴性；耐盐性良好，氯化钠浓度低于3％能很好生长，4％～7％生长很缓慢，大于7％时不生长；16S rDNA序列长度为1450bp，在Genbank中的登录号为JQ863308。

作为一个总的技术构思，本发明提供上述的沼泽红假单胞菌菌株在防治水稻稻曲病或提高水稻体内过氧化氢酶活性中的应用。

作为一个总的技术构思，本发明还提供一种沼泽红假单胞菌菌株的生防菌剂，所述生防菌剂是由上述沼泽红假单胞菌菌株经活化、种子培养、生产培养后得到。

作为一个总的技术构思，本发明相应提供上述沼泽红假单胞菌菌株的生防菌剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)活化：将上述本发明的沼泽红假单胞菌菌株的保存种按双层平板培养法进行培养，培养至红色单菌落出现；

(2)种子培养：将步骤(1)培养出的红色单菌落接入至血清瓶中，在温度为30℃～35℃、光照条件为2000Lx～3000Lx条件下，用光合细菌液体培养基培养至对数生长期；

(3)生产培养：将步骤(2)种子培养后得到的菌液按光合细菌菌株生产培养基总体积的1％～5％的接种量接种到生产瓶中，用光合细菌培养基进行生产培养，在温度为30℃～35℃、光照条件为2000Lx～3000Lx，培养至对数生长期；得到的培养液即为所述沼泽红假单胞菌菌株的生防菌菌剂。

作为一个总的技术构思，本发明还提供一种沼泽红假单胞菌菌株的生防药剂，所述生防药剂为上述生防菌剂经发酵、离心后制得的发酵上清液。