[发明专利]一种花烛胚性细胞快速增殖并再生植株的方法

权利要求书

1.一种花烛胚性细胞快速增殖并再生植株的方法，包括如下步骤：

（a）诱导形成胚性愈伤组织；   

（b）建立胚性细胞悬浮培养系，获得直径1.0~2.0毫米的胚性细胞团；

（c）利用步骤（b）获得的胚性细胞团再生植株，其中所述建立胚性细胞悬浮培养系包括如下步骤：

（b1）破碎所述胚性愈伤组织获得直径不超过1.0毫米的胚性细胞团；

（b2）将0.1~0.2克的胚性细胞团接种于悬浮培养基中，在温度25~27℃，光照800~1000 lux，90~110转/分钟震荡培养，其中所述悬浮培养基以MS培养基为基本培养基，每1升基本培养基中添加2.0~3.0毫克的6-BA、1.0~2.0毫克的2,4-D、20~40克的蔗糖，pH值为5.6~6.0；

（b3）6~8天继代一次，继代时将增殖的胚性细胞团破碎，将0.1~0.2克的胚性细胞团转移至新鲜的悬浮培养基的中，按相同条件继续培养，3~4周后，获得大量胚性细胞团。

2.如权利要求1所述的花烛胚性细胞快速增殖并再生植株的方法，所述步骤（a）包括：

（a1）取花烛的幼嫩苗叶片或茎段，经表面消毒处理，将叶片或茎段切成3~10毫米的片段，接种于胚性诱导培养基中；

（a2）在温度25~27℃的黑暗环境中培养3~6周，获得黄色的胚性愈伤组织。

3.如权利要求2所述的花烛胚性细胞快速增殖并再生植株的方法，其中步骤（a1）的花烛的品种为阿拉巴马。

4.如权利要求1所述的花烛胚性细胞快速增殖并再生植株的方法，其中步骤（b3）中所述继代为7天一次。

5.如权利要求1所述的花烛胚性细胞快速增殖并再生植株的方法，其中所述步骤（c）包括：

（c1）将获得的直径1.0~2.0毫米的细胞团接种至分化培养基中；

（c2）在温度25~27℃、光照强度为1000~1400 lux，每日10~14小时光照环境中培养6~10周后，形成绿色体细胞胚并进一步发育形成完整小植株。

6.如权利要求5所述的花烛胚性细胞快速增殖并再生植株的方法，其中所述分化培养基以1/4~1/20MS培养基为基本培养基，每1升基本培养基添加0~0.01毫克的6-BA、10克的蔗糖和6~9克的琼脂，pH值为5.6~6.0。

7.如权利要求5所述的花烛胚性细胞快速增殖并再生植株的方法，其中所述分化培养基以1/8~1/12MS培养基为基本培养基。

8.如权利要求5所述的花烛胚性细胞快速增殖并再生植株的方法，其中所述分化培养基以1/10MS培养基为基本培养基。

9.如权利要求5所述的花烛胚性细胞快速增殖并再生植株的方法，其中每1升基本培养基添加0.001~0.01毫克的6-BA。

10.如权利要求5所述的花烛胚性细胞快速增殖并再生植株的方法，其中每1升基本培养基添加0.005毫克的6-BA。