[发明专利]一种预测前列腺癌易感性的试剂盒和方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种预测前列腺癌易感性的试剂盒和方法，更具体的说是通过测定与前列腺癌相关基因GPRC6A的内含子上rs1606365位点多态性预测受试者对于前列腺癌的易感性，该方法可用于疾病的辅助诊断和新药开发，属于生物技术领域。

背景技术

前列腺癌（prostate cancer,PCa）是发生在男性生殖系统中最常见的恶性肿瘤。美国在对1975-2006癌症发病率进行统计后，估算2010年PCa新发病例为217,730例，位居男性好发肿瘤中第一位，PCa的死亡人数估计为32,050，在男性肿瘤死亡率中位居第二。年龄是PCa的一个重要风险因素，年龄45岁以下的基本很少发病，随年龄的增长而增加。美国癌症协会统计，40岁以下的男性PCa发病率为1/8499，40-59岁男性中为1/38，60-69岁男性中为1/15，70岁以上男性中则为1/8。随着我们国家人口老龄化，PCa的发病率在我国正逐年上升，上海标化发病率从1973～1975年的1.8/10万上升至1997～1999年的5.5/10万，贵州省南部地区部分县市PCa的发病率已从1994～1998年的1.72/10万上升到2004～2008年的4.28/10万，成为威胁我国男性健康的公共问题。

目前进行PCa遗传病因研究，多采用大规模全基因组关联研究和小样本多人群中的验证，并且GWAS鉴定的多个PCa易感SNPs已在多个不同人群中被复制确定，证明了SNPs作为基因组标志的关联分析方法在PCa遗传研究中的有效性。SNPs是指染色体基因组水平上单个核苷酸变异引起的DNA序列多态性，在人群中的频率需>1%，SNPs是双等位基因标记，这种单碱基变化中有70.1%为同型碱基之间的转换：如G/A或T/C，29.1%为发生在嘌呤和嘧啶之间的颠换。SNPs包含了已知多态性的80-90%，是最常见的遗传变异。

由于生存的选择压力导致SNP在单一基因和整个基因组中的分布呈不均匀性。SNPs在基因非编码区的数量是编码区的4倍，总数可达3百万个。SNPs以其密度高（平均每1kb就有1个）、代表性强（位于基因内部的SNPs可能直接影响蛋白质结构或表达水平）、遗传稳定性好（同微卫星多态性比较而言）、易于自动化分析（因SNPs在人群中为双等位基因标记，可简单以“＋/－或1/0”直接分型）等特点成为很好的遗传标志。

GPRC6A（G蛋白偶联受体C家族6组A亚型）（G protein-coupled receptor,familyC,group6,memberA，GPRC6A）基因是Wellendorph P等在2004年发现提出的，编码G蛋白偶联受体C家族6组A成员，G蛋白偶联受体（G protein-coupled receptors,GPCRs）是一类有7次跨膜区域，是人类基因组上由约近千个基因编码的大的受体家族，在许多生理病理进程包括发育、造血、血管生成、炎症、精神障碍、代谢疾病及病毒感染等中起重要作用。研究表明许多GPCRs和他们的配体参与肿瘤发生发展，如内皮缩血管肽类通过与GPCRs相互作用介导组织分化、发育和细胞增殖，通过增强细胞增殖抑制凋亡和调节基质成分在PCa和其他肿瘤中起重要作用。许多趋化因子受体如CXCR4、CXCR2、CCR7等在许多肿瘤表达上调，在肿瘤生长、侵袭和转移中起重要作用。许多被称为内皮分化基因家族的GPCRs是溶血磷脂酸或鞘氨醇-1-磷酸盐的受体，调节细胞的增殖、迁移和生存。如肺腺癌或肺腺癌3期时许多化学因子受体、神经肽受体、激素受体等：PAR2（GPR11）、Edg2（GPR2）等GPCRs表达上调；乳腺癌或乳腺癌3期时PAR2和CXCR-4表达增加；PCa时CXCR-3、GPR68等在PCa组织表达高于正常前列腺组织，其他肿瘤胃癌、转移黑色素瘤等的发展中也有多种GPCRs参与。

据估计，市场上接近30%的药物靶标是GPCRs或者与其相关的信号通路，其研发依据部分为许多疾病与GPCRs的变异和多态性关联，因此研究GPCRs与肿瘤包括GPCRs的多态性与肿瘤的关联可以为以干扰GPCRs或其介导的信号通路为基础的药物研发提供理论依据。