[发明专利]一种从玉米芯中获得均一木聚糖的制备方法无效
申请号: | 201210401506.4 | 申请日: | 2012-10-22 |
公开(公告)号: | CN102887965A | 公开(公告)日: | 2013-01-23 |
发明(设计)人: | 尹鸿萍;王莹;屈清慧;李明皓;陈书军;倪孟祥 | 申请(专利权)人: | 中国药科大学 |
主分类号: | C08B37/14 | 分类号: | C08B37/14;C07H3/06;C07H1/08 |
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地址: | 211198 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 玉米芯 获得 均一 聚糖 制备 方法 | ||
1.一种从玉米芯中获得均一木聚糖的制备方法,其特征在于采用如下工艺:
a.粉碎后的玉米穗轴粉过20目筛备用。加入蒸馏水,水浴热处理,用尼龙纱布过滤,弃滤液。
b.剩余固体中加入NaOH溶液,50~100℃搅拌浸提1~6小时,溶液冷却后,过滤,去除滤渣,滤液用无水乙酸调节pH到中性(或者不调pH,直接加乙醇醇沉),加入乙醇醇沉,终浓度为40%~80%。离心取沉淀,沉淀经过复水溶,低温高速离心,去除上清液,得沉淀即为均一木聚糖粗品,精制后即为均一木聚糖。
c.精制均一木聚糖,用β-D-1,4内切木聚糖酶和β-D-1,4外切木糖苷酶水解,得到的单糖采用HPLC分析。
d.本发明所制得的均一木聚糖为β-D-1,4木糖残基连接在一起的,其结构式如下:
通过HPLC外标法可计算出聚合度,聚合度的计算公式:其中m1为标准木糖的重量(单位g),m2为本发明所制得的均一木聚糖的重量(单位g),a1为标准木糖HPLC测单糖组成时的响应值,a2为本发明所制得的均一木聚糖HPLC测单糖组成时的响应值。本发明n在1~300之间。
2.如权利要求1所述的一种从玉米芯中获得均一木聚糖的制备方法,其特征在于,步骤a为:加入蒸馏水的固液比为1∶2~1∶20,热水浴的温度为50~100℃,水浴浸泡的时间为1~2小时;步骤b为:加入的NaOH的浓度为2%~20%,加入NaOH溶液的固液比为1∶2~1∶20,乙酸调节pH到5.5~7.0。
3.如权利要求1所述的一种从玉米芯中获得均一木聚糖的制备方法,其特征在于,步骤b为:均一木聚糖的精制过程为粗品经过NaOH复溶,去掉溶解的部分,得到的沉淀即为精制的木聚糖。步骤c为:50mg精制均一木聚糖中加入10±2mL含20万酶活单位的β-D-1,4内切木聚糖酶和β-D-1,4外切木糖苷酶水解,40±2℃反应1~3小时,并不断震荡直至溶液全部澄清。
4.如权利要求2所述的一种从玉米芯中获得均一木聚糖的制备方法,其特征在于,用乙酸调节pH,乙酸中和NaOH得到乙酸钠,乙酸钠在40%~80%中的溶解度比较大,比较利于最后产品的纯化,产品色泽较浅;或不中和,直接加乙醇醇沉,得到的产品色泽也比较浅,利于进一步研究。
5.如权利要求3所述的一种从玉米芯中获得均一木聚糖的制备方法,其特征在于,离心的得到的沉淀用0.1M~2.0M NaOH复溶,去除上清液,所得的固体即为精制的均一木聚糖。
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