[发明专利]一种仿生磷脂膜整体柱的制备方法及用途

说明书

技术领域

本发明属于有机聚合材料色谱研究领域，特别涉及一种磷脂有机整体分离介质的制备方法及应用，即为一种仿生磷脂膜整体柱的制备方法及应用。

背景技术

磷脂膜色谱又称固定化人工膜色谱（Immobilized Artificial Membrane,IAM），是新药研究中广泛使用的一种模拟生物膜色谱法，由于固定相结构跟细胞膜磷脂层类似，具有很好的仿生特性，已成功应用于预测药物的小肠吸收、血脑屏障通透性、透皮吸收、体内分布、药效活性等方面[ValkóKL,Nunhuck SB,Hill AP.Estimating unbound volume of distribution and tissue binding by in vitroHPLC-based human serum albumin and immobilised artificial membrane-bindingmeasurements.J Pharm Sci.2011;100(3):849-862；Liu YY,Li LL,Dai RJ,Qu F,Geng LN,Li XM,Deng YL.Assessment of the Enzymatic Activity and Inhibitionusing HPFA with a Microreactor,Trypsin,Absorbed on Immobilized ArtifcialMembrane.J Chromatogr Sci.2010;48(2):150-155]。目前，商业化磷脂膜色谱柱只有磷脂酰胆碱（Phosphatidyl cholines，PC）的填充柱（Regis Chem Co,MortonGrove，IL，USA），主要制备策略是通过双链的酯键、单链的醚键或者删除甘油骨架的单链将磷脂酰胆碱极性官能团键合到硅胶表面，可以很好地用于蛋白质分离和预测药物的膜渗透性等。但目前的IAM填充柱存在如色谱柱填充制备复杂、磷脂类型单一、细胞膜仿生性不强、pH适应范围窄等不足，严重限制了磷脂膜色谱柱在药物研发中的应用。

有机聚合物整体色谱柱（monolithic column）是由单体、交联剂、致孔剂和引发剂等组成的混合物通过原位聚合得到的连续均一的棒状聚合物，它具有制备过程简单、渗透性好、传质速度快、生物兼容性好、耐酸碱性好、单体种类多等优点，可实现快速、高效、高通量的分离，近年来已引起人们的热切关注[Smith NW，Jiang Z.Developments in the use and fabrication of organicmonolithic phases for use with high-performance liquid chromatography andcapillary electrochromatography.J ChromatogrA2008,1184(1-2):416-440;JiangZ,Smith NW，Liu Z.Preparation and application of hydrophilic monolithic columns.J Chromatogr A2011,1218(17):2350-2361.]。针对不同的分析客体和目的，设计合成新型的单体，并制备相关的特殊结构的整体柱，一直是整体色谱柱研究的热点。本课题组[Jiang Z,Reilly J,Everatt B,Smith NW.Novel zwitterionicpolyphosphorylcholine monolithic column for hydrophilic interactionchromatography.J Chromatogr A.2009;1216(12):2439-48.]用2-甲基丙烯酰羟乙基磷酰胆碱（MPC）为单体，成功制备了含2个碳链磷酸胆碱官能团的毛细管整体柱，具有良好通透性、机械强度和孔径分布，但与细胞膜磷脂层的18个碳链长度连接磷酸胆碱官能团的结构相差较大。鉴此，制备与细胞膜磷脂双分子层高度接近的有机聚合物，开发出制备简单、重现性和稳定性好、选择性强、预测准确性高的新型磷脂膜整体色谱柱和以此为母体基质制备成的细胞膜亲和整体柱，可为新药研发中预测与药物膜相互作用、细胞膜渗透性、药物磷脂沉积安全性等有关的药理作用提供有效的技术支撑。目前，相关的磷脂膜整体色谱柱的研究尚未见文献报导。

发明内容

为了解决上述现有技术中存在的不足之处，本发明的首要目的在于提供一种仿生磷脂膜整体柱的制备方法。

本发明的另一目的在于提供上述方法制备得到的仿生磷脂膜整体柱。