[发明专利]一种利用废弃茶渣制备抗氧化肽的方法

权利要求书

1.一种利用废弃茶渣制备抗氧化肽的方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）、碱溶酸沉：利用碱溶酸沉法提取茶渣蛋白；

（2）、酶解：采用蛋白酶对提取的茶渣蛋白进行有限酶解，灭酶，冷冻干燥，制备茶渣蛋白多肽复合物；

（3）、超滤：采用超滤膜，选择截留分子量分别为＜3500 Da、3500～8000 Da、＞8000 Da的超滤膜对茶渣蛋白多肽复合物溶液进行分离，获得分子量＜3500 Da、3500～8000 Da或＞8000 Da的具有抗氧化活性的多肽复合物；

（4）、冷冻干燥。

2.根据权利要求1所述利用废弃茶渣制备抗氧化肽的方法，其特征在于：步骤（1）中，所述碱溶酸沉的操作如下：首先将茶渣沸水浴20-30分钟后纱布过滤得除杂后的茶渣，将除杂后的茶渣与0.06-0.25mol/L NaOH以w/v 1：20-60的比例混合进行碱提，提取时间20-60min，温度50-100℃，提取后用纱布过滤，滤液为碱提的茶渣蛋白溶液，用盐酸调节碱提的茶渣蛋白溶液pH至2.5-5.0进行蛋白沉淀，离心得沉淀蛋白，水洗至中性再次离心，将沉淀冷冻干燥即得茶渣蛋白。

3.根据权利要求1所述利用废弃茶渣制备抗氧化肽的方法，其特征在于：所述碱溶酸沉的操作如下：首先将茶渣沸水浴20-30分钟后纱布过滤得除杂后的茶渣，将除杂后的茶渣与0.06-0.1mol/L NaOH以w/v 1：40-60的比例混合进行碱提，提取时间40-60min，温度80-90℃，提取后用纱布过滤，滤液为碱提的茶渣蛋白溶液，用盐酸调节碱提的茶渣蛋白溶液pH至3-4进行蛋白沉淀，离心得沉淀蛋白，水洗至中性再次离心，将沉淀冷冻干燥即得茶渣蛋白。

4.根据权利要求2所述利用废弃茶渣制备抗氧化肽的方法，其特征在于：所述离心得沉淀蛋白中的离心条件是4000 r/min，4-10℃，离心 10-20min。

5.根据权利要求1所述利用废弃茶渣制备抗氧化肽的方法，其特征在于将步骤（2）得到的茶渣蛋白多肽复合物溶于蒸馏水中，配成浓度为0.5-2.0mg/mL茶渣蛋白多肽复合物溶液。

6.根据权利要求1所述利用废弃茶渣制备抗氧化肽的方法，其特征在于步骤（2）中，所述酶解的具体操作如下：将茶渣蛋白溶解在水中使蛋白质量浓度达0.5-5.5%，调节pH至7.0-7.5，温度保持在50-55℃，加入Protamex蛋白酶2000～8000U/g茶渣蛋白，水解20-50min，水解度控制在8-10%，灭酶，冷冻干燥，得到茶渣蛋白多肽复合物。

7.根据权利要求1所述利用废弃茶渣制备抗氧化肽的方法，其特征在于步骤（2）中所述灭酶的操作为：酶解反应结束后，在沸水浴10min灭酶。