[发明专利]一种从桑叶中提取制备1-脱氧野尻霉素的工艺方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从桑叶中提取制备1-脱氧野尻霉素的工艺方法；属于从天然产物中提取分离药理活性成分的技术。

背景技术

桑叶为桑科植物桑(Morus alba L.)的叶子，是我国传统的中药材之一，中医理论认为它具有疏散风热、清肺润燥、平抑肝阳、清肝明目、凉血止血等功效。现代科学研究表明，桑叶中含有矿物质、维生素、氨基酸、黄酮类、生物碱类、多糖类等多种化学成分，具有降血糖、降血压、抗衰老、抗菌、抗病毒等生理作用；尤其是桑叶中的多羟基生物碱类成分，表现出较强的降血糖活性，是近年来桑叶中研究较为热点的组分之一，此类多羟基生物碱中具有代表性的为1-脱氧野尻霉素(1-Deoxynojirimycin，1-DNJ)，它可竞争性的抑制小肠粘膜上的α-糖苷酶活性，降低餐后血糖浓度，从而发挥治疗糖尿病的作用；另外研究表明1-DNJ还具有抗病毒、抗肿瘤、抑菌等多种生物活性；因此1-DNJ具有很高的应用价值。如专利申请号：201110148433.8“延缓α-糖苷酶抑制剂吸收及增强降糖药效的口服制剂”以1-DNJ（或者其他α-糖苷酶抑制剂）和一定比例的辅料混合来制备口服降血糖制剂；专利申请号：200910303534.0“药物组合物”提供了一种应用于非肠道使用的含有1-DNJ的抗病毒药物组合；专利申请号：200510026787.X“1-脱氧野尻霉素在制备治疗糖尿病肾病药物中的应用”公开了一种1-DNJ在治疗糖尿病肾病中的应用。

现有的关于桑叶中提取1-DNJ的专利也有很多，其中专利申请号：03101988.9“一种含有桑叶总碱浸膏的制剂及其制备方法”通过在桑叶提取液中加入絮凝剂，再经过阳离子树脂，最后得到的浸膏中1-DNJ含量在50%以上；专利申请号：200710067498.3“一种从桑叶中提取1-脱氧野尻霉素的方法”将桑叶提取液冷却沉淀后直接过阳离子树脂，其1-DNJ的纯度仅在10%以上；专利申请号：200810122998.7“一种从桑叶总生物碱中分离1-脱氧野尻霉素单体的方法”以1-DNJ含量在40%以上的桑叶总生物碱为原料，通过阳离子树脂后，还需要经过多次的重结晶得到1-DNJ的单体。该专利对于制备1-DNJ原料的要求较高，且工艺也比较复杂；专利申请号：200910167602.5“天然产物中提取分离高纯1-脱氧野尻霉素的方法”以桑叶、桑枝、桑葚、蚕沙等为原料，通过阴离子树脂，阳离子树脂，氯仿萃取、正丁醇萃取，乙醇结晶，最后经凝胶柱层析得到单体1-DNJ，工艺过程更加繁琐复杂；专利申请号：201110021131.4“桑叶中1-脱氧野尻霉素的制备方法”采用高压脉冲电场提取，再经阳离子树脂、乙酸乙酯萃取、活性炭处理、最后再乙醇重结晶得到1-DNJ单体。脉冲电场提取，对于设备的要求较为苛刻；专利申请号：201110186498.1“一种利用膜分离技术制备1-脱氧野尻霉素的方法”采用了膜分离技术制备1-DNJ，纯度在80%左右，但在膜分离的技术流程中，膜孔不可避免的会被栓塞，会被污染，需要定期的清洗检查等，且成本较高。

从上述中，可以发现现有的专利技术在制备1-脱氧野尻霉素存在着诸多问题，并且也没有对最终的1-DNJ产品进行有机溶剂残留的检测控制。因此，本发明提供一种从桑叶中提取制备分离1-DNJ的工艺流程，通过该工艺流程可从桑叶中得到纯度在70%以上的1-DNJ产品，并且该工艺过程所得1-DNJ产品无有机溶剂残留。

发明内容

本发明的目的是提供一种从桑叶中提取制备1-脱氧野尻霉素的工艺方法，制备含量在70%以上的1-脱氧野尻霉素产品，并且解决了最终产品在溶剂残留方面的问题。

本发明一种从桑叶中提取制备1-脱氧野尻霉素的工艺方法，经过以下步骤实现：

1）将桑叶粉碎，过10～30目筛网，根据1-脱氧野尻霉素的极性较大和水溶性的特点，选用水或者含水的乙醇回流提取，制得桑叶提取液；

2）将所述的桑叶提取液浓缩，得A液，所述的A液的体积以升为单位与所述桑叶质量以千克为单位的数值比为0.5:1～2:1；再向A液中加入体积百分比浓度为95%以上的乙醇，静置10～18小时，过滤或离心除去沉淀物，母液再次浓缩，浓缩方法采用旋转蒸发仪或者浓缩罐内进行，浓缩时真空度在0.05～0.09MPa，温度在60℃～90℃，至和A液相同体积，得B液；所述乙醇的加入体积为A液体积的1～4倍；；此环节可有效的除去提取液中乙醇不溶的多糖、蛋白等杂质，减少后续环节中样品的处理量提高1-脱氧野尻霉素含量；