[发明专利]尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸的制备方法

权利要求书

1.一种尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸的制备方法，其特征在于：该制备方法以1,2,3,5-四乙酰-β-D-呋喃核糖为起始原料，依次通过缩合反应、氨解反应、磷酸化反应制备尼克酰胺单核苷酸；

然后将制得的尼克酰胺单核苷酸与腺嘌呤核苷三磷酸混合，在烟酰胺核苷酸腺苷转移酶和焦磷酸酶存在的条件下发生酶催化反应，制得尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的酶催化反应中，反应物尼克酰胺单核苷酸与腺嘌呤核苷三磷酸的摩尔比为1:1～1:4。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于：所述的酶催化反应中，尼克酰胺单核苷酸的浓度为6g/L～72g/L，腺嘌呤核苷三磷酸浓度为8g/L～96g/L；

所述的烟酰胺核苷酸腺苷转移酶为酶冻干粉形式的烟酰胺核苷酸腺苷转移酶，其适用浓度为1～10g/L，或者是含酶细胞形式的烟酰胺核苷酸腺苷转移酶，其适用浓度为10～100g/L；

所述的焦磷酸酶为酶冻干粉形式的焦磷酸酶，其适用浓度为1～10g/L，或者是含酶细胞形式的焦磷酸酶，其适用浓度为10～100g/L。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的酶催化反应在pH值为4～8的磷酸盐缓冲液中进行。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述酶催化反应完成后，尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸的分离纯化包含以下依次进行的步骤：超滤、过LX-90大孔树脂柱、水洗脱、冻干。

6.如权利要求1-5中任意一项所述的方法，其特征在于：所述的缩合反应中，以1,2,3,5-四乙酰-β-D-呋喃核糖为基准，反应物三氟甲磺酸三甲基硅脂的反应当量为2:1～1:2，反应物烟酰乙酯的反应当量为1:1～1:3；所述缩合反应的温度为0~60℃。

7.如权利要求1-5中任意一项所述的方法，其特征在于：所述氨解反应中，以1,2,3,5-四乙酰-β-D-呋喃核糖为基准，反应物氨气的反应当量为1~10，所述氨解反应的温度为-10~10℃。

8.如权利要求1-5中任意一项所述的方法，其特征在于：所述磷酸化反应中，以1,2,3,5-四乙酰-β-D-呋喃核糖为基准，反应物三氯氧磷的反应当量为1~10，所述磷酸化反应的温度为-20~20℃。