[发明专利]从甘草中同步分离甘草苷和甘草苷芹糖的方法

说明书

技术领域

本发明涉及从中草药中制备活性成分的方法，具体涉及一种从甘草中同步分离甘草苷和甘草苷芹糖的方法。

背景技术

甘草为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch．、胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat．或光果甘草Glycyrrhiza glabra L．的干燥根及根茎。临床中的应用有甘草和炙甘草，其中甘草具有补脾益气、清热解毒、化痰止咳、缓急止痛等作用，常用于治疗脾胃虚弱，倦怠乏力，咳嗽痰多等。甘草中主要含有皂苷和黄酮类成分，研究发现甘草黄酮类成分有抗菌、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒等生理活性。甘草苷是甘草中主要的黄酮类成分，具有抗病毒，抗氧化，抗心律失常等作用。同时，甘草苷还是食品高甜度的甜味剂和解毒剂，其甜度约为蔗糖的177倍，2010年版《中国药典》中规定甘草干燥品含甘草苷不得少于0.5％，其含量的高低作为评价甘草质量的重要指标。甘草苷芹糖是甘草中重要的黄酮类成分，据报道，甘草苷芹糖具有止咳、平喘、祛痰、抗病毒等作用。

现有技术中分离纯化活性成分的方法较多，主要有色谱法，但是不同植物中含有的活性成分种类和结构都存在很大的差异，从而化学性质存在差异，在提取纯化过程中套用一般的提取纯化方法，得到的活性成分的纯度不高，如要达到很高的纯度，其分离效率较低，成本较高。目前针对甘草提取纯化高纯度甘草苷和甘草苷芹糖的报道较少，且甘草中化学成分复杂，在提取分离过程中非常困难。公开号为CN101289480发明名称为一种甘草苷的分离制备方法的专利中通过水提醇沉、膜分离，然后使用大孔树脂分离甘草苷；公开号为CN102050851A发明名称为甘草苷及其制备方法的专利，是从甘草酸粉中提取甘草苷，采用稀氨水提取，有机溶剂萃取，然后聚酰胺树脂分离甘草苷；公开号为CN102391330A发明名称为从甘草中提取甘草苷的方法的专利，通过水提、过混合树脂柱分离得到甘草苷，但是这些方法均采用单级分离的方式，并且产量低，不适合大规模生产；申请号为200710011041.0发明名称一种甘草苷的制备方法中公开甘草药材通过水提、醇沉、先后经分子量膜分离仪、大孔树脂柱、高效工业色谱柱分离，冷冻干燥得甘草苷，该方法虽然一次制备量大，但是该方法仍然采取单级分离的方式，生产效率低，并且仅得到了甘草苷，造成了资源的浪费。

总之，现有的方法均有间歇不连续化操作、上柱液和洗脱液利用率不高等缺点，合理利用树脂的选择性吸附分离的优势，优化分离工艺，将大大降低生产成本，提高生产效率，无毒环保，为甘草苷和甘草苷芹糖的制备工艺开辟全新的工业格局。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从甘草中同步分离甘草苷和甘草苷芹糖的方法。

具体操作步骤如下：

为实现上述目的本发明采用技术方案为：

一种从甘草中同步分离甘草苷和甘草苷芹糖的方法，

1）提取：以甘草为原料,加入到原料8-20倍量（mL/g）的溶剂中，经回流或超声提取，提取液减压浓缩所得残液即为中间产物A，其中原料与溶剂按质量体积比混合。

2）树脂柱一次分离纯化：将中间产物A以1-10BV/h的流速通过大孔树脂柱，动态吸附至穿透；再用5-15BV的蒸馏水以5-20BV/h的流速淋洗上述大孔吸附树脂柱洗脱至无色，除去水溶性杂质；最后用浓度为40％-70％的乙醇以5-15BV/h的流速进行洗脱，收集洗脱液直至洗脱液无色，而后减压浓缩所得残液即为中间产物B；

3）树脂柱的二次分离纯化：中间产物B以1-10BV/h的流速通过大孔吸附树脂柱，动态吸附至穿透；再用5-15BV的蒸馏水以5-20BV/h的流速淋洗上述大孔吸附树脂柱去除水溶性杂质；最后用30％-50％的乙醇以5-20BV/h的流速进行洗脱，收集洗脱液直至洗脱液无色，将收集的洗脱液减压浓缩至浸膏，即得中间产物C；

4）中压梯度洗脱系统分离：中间产物C以甲醇和水为流动相，用中压梯度洗脱系统在50-200ml/min的流速下进一步分离，按出峰时间先后顺序分别收集甘草苷芹糖和甘草苷（其中，收集出峰时间为26-28min的色谱峰即为甘草苷芹糖，收集出峰时间为29-31min的色谱峰即为甘草苷）。

所述步骤1）将原料甘草干燥粉碎至30-50目后，加至8-20倍量（mL/g）的溶剂中，经回流或超声提取2-3次，每次1-3小时，合并提取液，提取液过滤后，减压浓缩回收溶剂，残液中加入水使其浓度为5-20g/L，充分混匀，即得中间产物A；所述提取溶剂为体积分数为70％-100％的甲醇或乙醇。