[发明专利]从罗布麻叶中同时制备金丝桃苷和异槲皮苷的方法

说明书

技术领域

本发明涉及中药现代化分离纯化技术，具体的说是一种从罗布麻叶中同时制备金丝桃苷和异槲皮苷的方法

背景技术

罗布麻叶为夹竹桃科多年生草本植物罗布麻Apocynum venetum.的干燥叶，具有平肝安神、清热利水之功效，其药用、茶饮历史悠久。现代药理研究表明，罗布麻叶可用来治疗高血压、高血脂、冠心病、哮喘病、气管炎等疾病，具有较好的效果。

金丝桃苷和异槲皮苷是罗布麻中主要的活性成分。金丝桃苷又名槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷，属于黄酮醇苷类化合物，苷元为槲皮素，糖基为吡喃半乳糖，由槲皮素的3位O原子以β糖苷键与糖基相连，具有局部镇痛、抗过敏、抗炎、抗抑郁、抗菌、止咳等作用，对心肌缺血再灌、脑缺血再灌、脑梗塞具有良好的保护作用。异槲皮苷又名槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，具有降血压、抗炎、抗抑郁等作用，是田基黄治疗肝炎的有效成分之一。

金丝桃苷                    异槲皮苷

中国专利02146370.0公开了“一种金丝桃苷的制备方法及药物新用途”，所用药材为黄蜀葵花，经加热回流或冷浸渗滤提取，提取液上聚酰胺树脂柱，真空干燥后用乙酸乙酯和乙醇混合溶剂提取，干燥后用醇复结晶得到金丝桃苷。中国专利200810195922.7公开了“一种金丝桃苷的提取方法及其制剂和用途”，以黄蜀葵花为原料，用乙醇回流提取，再用正丁醇或乙酸乙酯萃取，真空干燥后用乙醇和乙酸乙酯的混合溶剂回流提取，干燥后用乙醇重结晶得到金丝桃苷。中国专利201010158044.9公开了“一种分离金丝桃苷的方法”，以山里红或山楂叶为原料，经回流提取，上大孔树脂柱，减压浓缩后上硅胶柱直接得到金丝桃苷。中国专利201110075635.4公开了“罗布麻叶中金丝桃苷的制备方法”，罗布麻叶经加热回流提取、醇沉、上大孔树脂柱、萃取、重结晶得到金丝桃苷。以上方法均存在提取率低，制备量小，并且仅得到了金丝桃苷，造成了资源的浪费。中国专利03150847.2公开了“金丝桃苷和异鼠李素-3-O-半乳糖苷对照品的同时制备方法”该方法是以吴茱萸为原料，经回流提取，再用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取部分经两次柱层析纯化，再重结晶，分别得到金丝桃苷和异鼠李素-3-O-半乳糖苷两种对照品。该方法虽然同时制备得到金丝桃苷和异鼠李素-3-O-半乳糖苷，但是该方法同样存在处理量小、效率低的缺点。中国专利200610054268.9公开了“贯叶连翘中金丝桃苷和金丝桃素的制备方法”，以贯叶连翘为原料，采用CTAB反胶束萃取得到金丝桃苷和金丝桃素，该方法工艺复杂，产品得率低，不适合大规模生产。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从罗布麻叶中同时制备金丝桃苷和异槲皮苷的方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种从罗布麻叶中同时制备金丝桃苷和异槲皮苷的方法，

1）提取：以罗布麻叶为原料经加热回流或超声提取，提取液减压浓缩，浓缩液用石油醚萃取除去色素及脂溶性杂质，萃取后的水相经稀释即为中间产物A；

2）富集：中间产物A以1-10BV/h的流速通过大孔吸附树脂柱，动态吸附至饱和；再用3-15BV的水以5-20BV/h的流速淋洗上述大孔吸附树脂柱至无色；最后用3-15BV体积分数为30-50％的乙醇在3-10BV/h的流速下进行洗脱，收集洗脱液直至洗脱液无色，将收集所得洗脱液减压浓缩即得中间产物B；

3）纯化：将上述中间产物B在甲醇中重结晶，得金丝桃苷和异槲皮苷的混合物C；将混合物C利用中压梯度系统进行分离，具体为以15-40μm的C18硅胶键合固定相为色谱填料，流动相为甲醇和水，并以50-200mL/min的流速进行洗脱；按出峰时间先后顺序分别收集金丝桃苷和异槲皮苷（其中金丝桃苷色谱峰出峰时间范围为26min-32min，收集30min-36min的色谱峰即为异槲皮苷），而后分别减压浓缩回收有机溶剂，冷冻干燥后即得高纯度金丝桃苷和异槲皮苷粉末。

所述步骤1）向干燥粉碎的罗布麻叶中加入8-20倍量（mL/g）的溶剂，经加热回流或超声提取2-3次，每次1-3小时，合并提取液；提取液过滤后，减压浓缩得到浸膏，浸膏加水溶解，用等体积的石油醚萃取3-4次，而后将萃取后的水相稀释至浓度为1-10g/L，充分混匀，即得中间产物A。

所述步骤1）溶剂为体积分数为70％-100％甲醇或乙醇。

所述步骤2）大孔吸附树脂柱为串联的大孔吸附树脂柱；所述各个串联的大孔吸附树脂柱的径高比为1:4-1:10。