[发明专利]一种琥珀酸和乳酸的高效液相色谱拆分方法

说明书

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种琥珀酸和乳酸的拆分方法。

背景技术

琥珀酸因为其分子中有多种功能团而成为许多产品，如洗涤剂、医药和抗生素的原材料；微生物发酵法生产琥珀酸容易产生发酵副产物乳酸，目前报道中所用的方法如纳滤难以将它们进行分离，而高效液相色谱法可以方便有效的将琥珀酸和乳酸分离，得到高纯琥珀酸。

发明内容

本发明的目的是提供一种琥珀酸和乳酸的高效液相色谱系统的拆分方法，为实现上述发明目的采用的技术方案如下：一种琥珀酸和乳酸的高效液相色谱的拆分方法，其特征在于用聚合物树脂HBCT-8为固定相，用甲醇和水的混合物为流动相，用高效液相色谱系统法拆分出高纯度的琥珀酸和乳酸，包括以下步骤：

（1）、将样品溶于流动相中，浓度为：0～100mg/ml；

（2）、用高效液相色谱系统拆分琥珀酸和乳酸；

（3）、浓缩得到高纯度的琥珀酸和乳酸。

本发明具有以下技术效果：本发明采用高效液相色谱系统，拆分出具有光学纯度的琥珀酸和乳酸，工艺简单，产品质量稳定，溶剂采用甲醇和水，可回收利用，无污染，实现清洁生产。

具体实施方式

1.色谱柱填料及流动相（溶剂）选择

以聚合物树脂HBCT-8为固定相，填料粒度为100~150um，微粒越小，粒径分布越窄，越有利于分离，但粒径越小系统压力越大，粒径选择为100um；流动相(溶剂)为甲醇和水的混合溶液。

2.分离步骤

样品用流动相溶解，浓度为0~100mg/ml，采用半制备型高效液相色谱仪进行分离纯化，聚合物树脂HBCT-8填料为江苏汉邦科技有限公司产品，粒径为100um，流动相为甲醇和水，等度洗脱。采用的紫外光度检测器的检测波长为254 nm，收集琥珀酸和乳酸，经HPLC分析纯度≥97.0%。

 实施例1

样品用流动相溶解，浓度为15mg/ml，采用半制备型高效液相色谱仪进行分离纯化，色谱柱尺寸为Φ10×250mm，聚合物树脂HBCT-8填料为江苏汉邦科技有限公司产品，粒径为100um，上样量10mg，流动相为甲醇：水=0.1:100，等度洗脱，采用的紫外光度检测器的检测波长为254 nm，分别收集琥珀酸和乳酸，经HPLC分析纯度≥97.7%。

实施例2

样品用流动相溶解，浓度为50mg/ml，采用半制备型高效液相色谱仪进行分离纯化，色谱柱尺寸为Φ20×250mm，聚合物树脂HBCT-8填料为江苏汉邦科技有限公司产品，粒径为100um，上样量80mg，流动相为甲醇：水=0.5:100，等度洗脱，采用的紫外光度检测器的检测波长为254 nm，分别收集琥珀酸和乳酸，经HPLC分析纯度≥97.5%。

实施例3

样品用流动相溶解，浓度为100mg/ml，采用半制备型高效液相色谱仪进行分离纯化，色谱柱尺寸为Φ20×250mm，聚合物树脂HBCT-8为江苏汉邦科技有限公司产品，粒径为100um，上样量120mg，流动相为甲醇：水=1:100，等度洗脱，采用的紫外光度检测器的检测波长为254 nm，分别收集琥珀酸和乳酸，经HPLC分析纯度≥97.2%。