[发明专利]一种用于酸性磷酸酶检测的液体试剂盒和检测方法有效
申请号: | 201210436202.1 | 申请日: | 2012-11-05 |
公开(公告)号: | CN103808712B | 公开(公告)日: | 2017-12-19 |
发明(设计)人: | 杜少卿;蔡锦刚;唐玮 | 申请(专利权)人: | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 |
主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司44224 | 代理人: | 何平 |
地址: | 518057 广东省深圳市南山区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 酸性磷酸酶 检测 液体 试剂盒 方法 | ||
1.一种用于酸性磷酸酶检测的液体试剂盒,包括基质液和显色液,
所述基质液和所述显色液分开存放;
所述基质液含有酸性磷酸酶的底物,缓冲对的两类物质中的碱性物质和甘氨酸,所述基质液的pH值为8-11;
所述基质液底物选自磷酸酯;
所述基质液中的碱性物质为柠檬酸三钠或乙酸钠或磷酸氢二钠;
所述显色液含有对所述底物反应后的产物有显色反应的显色剂,缓冲对的两类物质中的酸性物质和甘氨酸,所述显色液的pH值为1-2;
所述显色液中显色剂选自重氮盐;
所述显色液中的酸性物质为柠檬酸或乙酸;
所述显色液还含有Triton X-100和十二烷基硫酸钠;
所述基质液和所述显色液混合后得到工作液,所述缓冲对的两类物质和甘氨酸将所述工作液pH值维持在4-6。
2.根据权利要求1所述的液体试剂盒,其特征在于,所述磷酸酯为α-萘基磷酸酯。
3.根据权利要求1所述的液体试剂盒,其特征在于,所述重氮盐为4-氯-2-甲基苯重氮化盐。
4.根据权利要求1所述的液体试剂盒,其特征在于:所述基质液的pH值为10,所述基质液中的碱性物质为柠檬酸三钠。
5.根据权利要求1所述的液体试剂盒,其特征在于:所述显色液的pH值为1.2,所述显色液中的酸性物质为柠檬酸。
6.一种检测生物样本中酸性磷酸酶活性的方法,包括:提供基质液,
所述基质液含有酸性磷酸酶的底物,缓冲对的两类物质中的碱性物质和甘氨酸,所述基质液的pH值为8-11;
所述基质液底物选自磷酸酯;
所述基质液中的碱性物质为柠檬酸三钠或乙酸钠或磷酸氢二钠;
提供显色液,所述显色液含有对所述底物反应后的产物有显色反应的显色剂,缓冲对的两类物质中的酸性物质和甘氨酸,所述显色液的pH值为1-2;
所述显色液中显色剂选自重氮盐;
所述显色液中的酸性物质为柠檬酸或乙酸;
所述显色液还含有Triton X-100和十二烷基硫酸钠;
所述基质液和所述显色液混合后得到工作液,所述缓冲对的两类物质和甘氨酸将所述工作液的pH值维持在4-6;
将待测的含有酸性磷酸酶的生物样本与所述工作液混合,孵育反应后,检测吸光度值;
根据所述吸光度值计算得到所述酸性磷酸酶的活性。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:所述磷酸酯为α-萘基磷酸酯。
8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:所述重氮盐为4-氯-2-甲基苯重氮化盐。
9.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:所述基质液的pH值为10,所述基质液中的碱性物质为柠檬酸三钠;所述显色液的pH值为1.2,所述显色液中的酸性物质为柠檬酸,所述基质液与所述显色液以2:1混合均匀得到工作液。
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