[发明专利]一种参芪扶正注射液指纹图谱的建立方法

说明书

技术领域

本发明属于药物检测技术领域，具体涉及一种参芪扶正注射液指纹图谱的建立方法。

背景技术

中药复方质量控制是制约中药现代化发展的关键问题之一。中医理论强调中药的整体效应，重视在药效上的协同作用，以中药内一、二个有效成分作为定性、定量指标远不能有效地控制和评价中药的质量，更难以反映其安全性和有效性。中药复方是两味以上中药组合应用于疾病治疗的复方制剂，其质量控制的难度较单味中药更甚。近年来，中药指纹图谱和特征指纹图谱已广泛应用于质量控制，其中中药特征图谱系指从中药指纹图谱中选取若干专属性强的色谱峰或色谱峰组合组成特征指纹图谱，通过特征指纹峰的有无及变化来监控中药质量。在2010年版《中国药典》中，特征指纹图谱已被应用于多种中药中间体成分的质量控制中。

超高效液相色谱技术（UHPLC）是色谱技术的一大突破，以超高速度、超高灵敏度、超高分离度为优势，利用更小的色谱柱填料技术得到了更快、更灵敏的检测效果，在国外被广泛利用于农残、药物代谢等方面，在国内的应用也越来越普遍。

色谱质谱联用技术也是近年来发展迅速的一种高端分析技术，其中液相色谱质谱联用技术（LC-MS）是继气相色谱质谱联用技术（GC-MS）广泛应用后，逐渐被认识和接受的另一种联用技术，但由于仪器价格昂贵，还未得到广泛应用。液质联用仪采用的离子化技术，不仅能解决一些无紫外吸收成分的检测问题，如皂苷类成分，而且可以得到被离子化成分的精确分子量，对于成分及其结构的鉴别和确认提供了数据支撑。

参芪扶正注射液是中药大输液，具有益气扶正的功效，用于肺脾气虚引起的神疲乏力，少气懒言，自汗眩晕以及肺癌、胃癌见上述证候者的辅助治疗，为国家中药保护品种，保护品种号：ZYB2072004073。其质量标准中，【指纹图谱】项采用高效液相色谱-紫外检测器检测，有一定的局限性，如占主要含量的皂苷类成分在紫外无吸收，通过增加高效液相色谱-蒸发光散射检测器检测，可以对皂苷类成分进行监控，但样品前处理复杂，分析时间也很长，均不能全面、快捷地对其主要成分进行监控，有待改进。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是弥补已有技术的不足，目的在于提供一种参芪扶正注射液指纹图谱的建立方法。由此方法建立的指纹图谱可以作为标准指纹图谱，能够应用于鉴别参芪扶正注射液。

本发明通过以下技术方案实现上述目的：

一种参芪扶正注射液指纹图谱的建立方法，该方法包括采用超高压液相色谱质谱联用仪，例如超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用仪对参芪扶正注射液进行检测，其中色谱条件包括：

色谱柱：Agilent Zorbax Eclipse Plus C18，2.1mm×100mm，1.8μm；

流动相：流动相A为0.1%体积的甲酸水溶液，流动相B为0.1%体积的甲酸乙腈溶液；

采用梯度洗脱，洗脱程序如下，其中流动相比例均为体积百分比：

0~0.5min，流动相A为95%，流动相B为5%；

0.5~10min，流动相A为95%~75%，流动相B为5%~25%；

10~15min，流动相A为75%~45%，流动相B为25%~55%；

15~18min，流动相A为45%~0%，流动相B为55%~100%。

18~20min，流动相A为0%，流动相B为100%。

优选地，所述色谱条件还包括：

流速为0.35ml/min；

柱温为40℃；

进样量为5μl。

优选地，上述参芪扶正注射液指纹图谱的建立方法中，质谱的条件包括：

离子源为ESI源，负离子方式检测；

雾化气压力：35psig；

干燥气温度：350℃；

干燥气流速：10L/min；

毛细管电压：3500V；

毛细管出口电压：135V。

优选地，上述参芪扶正注射液指纹图谱的建立方法还包括通过以下步骤制备对照品溶液：取毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品、黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每ml各含毛蕊异黄酮葡萄糖苷0.004mg、黄芪甲苷0.006mg的溶液，即得。

优选地，上述参芪扶正注射液指纹图谱的建立方法还包括通过以下步骤制备供试品溶液：取参芪扶正注射液，用0.22um微孔滤膜滤过，即得。

优选地，上述参芪扶正注射液指纹图谱的建立方法包括如下步骤：