[发明专利]马杜霉素胶体金检测卡

说明书

技术领域

属于食品安全检测领域，具体涉及食品中有害残留物的检测方法，特别是马杜霉素试纸检测方法。

背景技术

马杜霉素 英文名称Maduramicin,又名马度米星.是一种较新型的聚醚类一价单糖苷离子载体抗生素，本品抗球虫谱广对子孢子和第一代裂殖体均有抗球虫活性。本品能有效控制6种常见的鸡球虫，对鸭球虫病也有良好的预防效果。混饲，每1000 kg饲料5～10 g马杜霉素由美国氰胺公司于20世纪80年代开发，1992年我国开发成功并大批量生产，由于价格较低，对球虫病具有良好的预防和治疗作用，使马杜霉素在临床得到广泛的应用。但该药毒性较大，安全范围窄，使用剂量非常接近鸡的中毒量，超量使用易引起禽中毒。家禽马杜霉素中毒一般为急性过程。急性死亡（1～ 2 d 内死亡）的动物一般会出现典型的中毒症状：东走西窜、站立不安、兴奋亢进等神经症状，或水样腹泻、腿软、行走及站立不稳。严重者两腿麻痹，昏睡直至死亡。亚慢性中毒表现为减食甚至食欲废绝，迅速消瘦，粪便呈现色泽变化，从青灰、浅绿、绿色至胆绿色，出现率约 20% 左右。家禽精神不振、蹲伏驱赶不动，甚至两脚瘫痪、驱赶时跗关节着地，两翅拍动、无力站立，甚至死亡。 在临床应用时常因使用不当，造成家禽中毒，经济损失较大。Ft%HWGE 

目前，现有的技术对于马杜霉素的检测主要依赖于色谱和质谱技术，也有酶联免疫检测试剂盒，但是还没有马杜霉素的检测卡出现。

发明内容

针对上述问题，本发明提供了一种快速检测马杜霉素的胶体金检测卡，能够满足现场快速检测的需要，检测快速，携带方便，操作简单，无需特殊设备和仪器，为此本发明者还提供了快速检测马杜霉素的胶体金检测卡的制备方法，其制备工艺简单，成本低。 一种快速检测马杜霉素的胶体金检测卡，其包括试纸条，所述试纸条封装于检测卡壳体中，所述检测卡壳体上开有加样孔和观测孔，所述试纸条包括底板，其特征在于:所述试纸条的底板上依次粘贴有吸水纸、硝酸纤维素膜、金标垫、样品垫，所述吸水纸和所述金标垫分别粘贴在所述硝酸纤维素膜两端，在所述硝酸纤维素膜的两端结合处，所述吸水纸和金标垫的一小段重叠压在所述硝酸纤维素膜上，所述样品垫粘贴在所述金标垫的另一端，所述样品垫的一小段重叠在所述金标垫上;所述金标垫上喷涂有金标抗马杜霉素单克隆抗体；所述硝酸纤维素膜上依次喷涂有材质为马杜霉素抗原的检测线、材质为羊抗鼠IgG的质控线。

其进一步特征在于：所述样品垫位置正对所述加样孔，所述硝酸纤维素膜位置正对所述观测孔。

一种快速检测马杜霉素的胶体金试纸条的制备方法，其特征在于:其包括以下步骤:

(1)用免疫原免疫的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞杂交融合，制备杂交瘤细胞，筛选能够稳定分泌抗马杜霉素单克隆抗体的细胞株，制备抗马杜霉素单克隆抗体；

(2)制备胶体金溶液；                                                                     

(3)用制备好的胶体金溶液标记抗马杜霉素单克隆抗体；

(4)用制备好的包被抗原以及羊抗鼠IgG处理硝酸纤维素膜；

(5)用制备好的金标抗三聚氰胺单克隆抗体处理金标垫；

(6)组装金标试纸条。                       

样品处理方法是：称取试样2±0.05 g于50 mL的离心管中，加入10 mL超纯水，在1800 r/min条件下用高速组织粉碎机打碎（约1 min），取粘稠液加50%三氯乙酸2 mL和二氯甲烷10 mL，在回旋式振荡器上高速振摇30 min。然后在4℃ 5000 rpm条件下离心30 min，取上清10 mL，加二氯甲烷2 mL，在回旋加速器上振荡混合20 min，再在4℃ 12000 rpm条件下离心30 min，上清液即为药物的抽提液。

本发明的优点是能快速检测出饲料、肌肉、组织中含有的马杜霉素，且节省检测成本，使用方便，检测快速，灵敏度高，结果准确。

附图说明

图1是马杜霉素检测卡外壳及检测试纸条在外壳内的安置图。

图2是马杜霉素检测卡检测试纸条结构示意图。

图3是检测试纸条硝酸纤维素膜上显示印迹带示意图。

具体实施方式