[发明专利]发酵制备中纯度赖氨酸硫酸盐的方法有效
申请号: | 201210440081.8 | 申请日: | 2012-11-07 |
公开(公告)号: | CN102911976A | 公开(公告)日: | 2013-02-06 |
发明(设计)人: | 马吉银;陈崇安;孟刚 | 申请(专利权)人: | 宁夏伊品生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12P13/08 | 分类号: | C12P13/08;C12N15/70;A23K1/16;C12R1/19 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 750100 宁夏回族自治区银川市*** | 国省代码: | 宁夏;64 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 发酵 制备 纯度 赖氨酸 硫酸盐 方法 | ||
1.发酵制备含L-赖氨酸硫酸盐的产品的方法,其包括:
(1)将编码氨基酸序列如SEQ ID No:l所示的蛋白或其变体的多核苷酸导入产L-赖氨酸的菌;
(2)在发酵条件下液体培养步骤(1)获得的菌,并收集培养的上清液,所述上清液中包含如下重量配比的氨基酸:
赖氨酸51~55份,优选为51.5~53.5份,更优选为52.3份;
天冬氨酸1.2~1.8份,优选为1.45~1.6份,更优选为1.54份;
苏氨酸0.8~1.1份,优选为0.9~1份,更优选为0.94份;
丝氨酸0.4~0.65份,优选为0.5~0.6份,更优选为0.56份;
谷氨酸2~3份,优选为2.2~2.6份,更优选为2.4份;
甘氨酸0.75~1.1份,优选为0.85~1份,更优选为0.92份;
丙氨酸1.2~1.6份,优选为1.3~1.5份,更优选为1.4份;
缬氨酸0.75~1.1份,优选为0.85~1份,更优选为0.93份;
甲硫氨酸0.3~0.5份,优选为0.35~0.48份,更优选为0.42份;
异亮氨酸0.45~0.75份,优选为0.55~0.65份,更优选为0.61份;
亮氨酸1~1.5份,优选为1.2~1.35份,更优选为1.27份;
酪氨酸0.5~0.8份,优选为0.6~0.75份,更优选为0.67份;
苯丙氨酸0.5~0.8份,优选为0.6~0.7份,更优选为0.64份;
组氨酸0.8~1.2份,优选为0.9~1.05份,更优选为0.97份;和,
精氨酸,0.9~1.3份,优选为1~1.2份,更优选为1.1份;
(3)向步骤(2)获得的上清液,加入硫酸并浓缩干燥至含水率小于3%(w/w)。
2.权利要求1所述的方法,其中变体的氨基酸序列为对如SEQ ID No:1所示的氨基酸序列添加、缺失和取代一个或几个氨基酸残基而获得的氨基酸序列,优选编码该变体的多核苷酸导入产L-赖氨酸的菌后在发酵条件下液体培养,培养的上清液包含如权利要求1所述重量配比的氨基酸。
3.权利要求1所述的方法,其中赖氨酸与硫酸的摩尔比为1~3∶0.5~1.5,优选为1.5~2.5∶0.75~1.25,更优选为2∶1。
4.权利要求1所述的方法,其中菌是大肠杆菌,优选是对L-赖氨酸反馈抑制脱敏的大肠杆菌。
5.权利要求1所述的方法,其中多核苷酸的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
6.含L-赖氨酸硫酸盐的产品(其优选是饲料添加剂),其包含赖氨酸硫酸盐68.1~73.5份,优选为68.8~71.5份,更优选为69.9份;天冬氨酸1.2~1.8份,优选为1.45~1.6份,更优选为1.54份;和,谷氨酸2~3份,优选为2.2~2.6份,更优选为2.4份,优选其包含:
赖氨酸硫酸盐68.1~73.5份,优选为68.8~71.5份,更优选为69.9份;
天冬氨酸1.2~1.8份,优选为1.45~1.6份,更优选为1.54份;
苏氨酸0.8~1.1份,优选为0.9~1份,更优选为0.94份;
丝氨酸0.4~0.65份,优选为0.5~0.6份,更优选为0.56份;
谷氨酸2~3份,优选为2.2~2.6份,更优选为2.4份;
甘氨酸0.75~1.1份,优选为0.85~1份,更优选为0.92份;
丙氨酸1.2~1.6份,优选为1.3~1.5份,更优选为1.4份;
缬氨酸0.75~1.1份,优选为0.85~1份,更优选为0.93份;
甲硫氨酸0.3~0.5份,优选为0.35~0.48份,更优选为0.42份;
异亮氨酸0.45~0.75份,优选为0.55~0.65份,更优选为0.61份;
亮氨酸1~1.5份,优选为1.2~1.35份,更优选为1.27份;
酪氨酸0.5~0.8份,优选为0.6~0.75份,更优选为0.67份;
苯丙氨酸0.5~0.8份,优选为0.6~0.7份,更优选为0.64份;
组氨酸0.8~1.2份,优选为0.9~1.05份,更优选为0.97份;和,
精氨酸,0.9~1.3份,优选为1~1.2份,更优选为1.1份。
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