[发明专利]黄芪多糖与黄芪甲苷的含量测定方法

说明书

技术领域

本发明属于测定方法技术领域，尤其涉及一种黄芪多糖与黄芪甲苷的含量测定方法。

背景技术

黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，具有补气升阳，固表止汗，托疮生肌，利水消肿的作用，为许多中成药的组成成分。黄芪的有效成分主要有黄芪多糖和黄芪皂苷，这两种物质分属于不同的提取部位。目前市场上以这两种物质为有效成分的注射液，分别是主要成分为黄芪多糖的黄芪多糖注射液和主要成分为黄芪皂苷的黄芪注射液。黄芪皂苷对急梗犬心有改善心肌收缩功能，缩小心机梗塞面积，减轻心肌损伤的作用。

黄芪多糖可以提高机体免疫，并具有广谱的抗病毒作用，能有效保护小鼠免受流感病毒的感染，对口腔炎病毒也有抑制作用。为充分发挥疗效，本实验研制了既含有黄芪皂苷又含有黄芪多糖的黄芪复合注射液。 现有黄芪多糖与黄芪甲苷的含量测定方法复杂、精密度差，结果不够准确。

发明内容

本发明就是针对上述问题，提供一种测定方法简单、精密度高，结果够准确的黄芪多糖与黄芪甲苷的含量测定方法。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案。

（1）称取干燥至恒重的无水葡萄糖量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀得葡萄糖液。

（2）吸取步骤（1）的葡萄糖液于量瓶中，补足蒸馏水，并给试管编号。然后分别加2%苯酚试液，摇匀，缓慢滴加浓硫酸，振摇1～3min后，于沸水浴中加热10～20min，取出置冷水中冷却至室温，用蒸馏水定溶至刻度，摇匀冷却后以苯酚-浓硫酸溶液为空白，于波长490nm处测吸光度。

作为一种优选方案，本发明所述步骤（2）振摇2min。

作为另一种优选方案，本发明所述步骤（2）于沸水浴中加热15min。

本发明有益效果。

黄芪甲苷是含有黄芪药材的中药制剂的常用检测指标。目前黄芪甲苷的含量测定方法主要有薄层扫描法、高效液相色谱紫外检测器测定法、高效液相色谱蒸发光检测器测定法由于薄层扫描法受影响因素较多，干扰较难排除，精密度和准确度不高，重现性差，现已很少使用。而采用高效液相色谱紫外检测器测定法测定黄芪甲苷含量，由于黄芪甲苷无特征紫外吸收，只能采用紫外检测器末端波长检测，对样品纯化要求较高，操作要求较为严格，容易受到杂质干扰，分离度和重现性均差。而蒸发光检测器的原理是流动相被高压气流雾化，雾化形成的小液滴进入漂移管，流动相被蒸发，而被分析检测的物质颗粒受激光照射产生散热，散热光由光电倍增管收集得到响应，由被分析物质的颗粒的数量和大小决定光散射检测器的响应大小，而不受流动相溶剂的干扰。本文采用高效液相色谱蒸发光检测器测定法测定黄芪复合注射液中黄芪甲苷含量，样品分离度良好，回收率高，此方法简单、精密度高，结果准确、可靠，可用于黄芪复合注射液中黄芪甲苷的质量控制。

具体实施方式

本发明采用如下技术方案。

（1）称取干燥至恒重的无水葡萄糖量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀得葡萄糖液。

（2）吸取步骤（1）的葡萄糖液于量瓶中，补足蒸馏水，并给试管编号。然后分别加2%苯酚试液，摇匀，缓慢滴加浓硫酸，振摇1～3min后，于沸水浴中加热10～20min，取出置冷水中冷却至室温，用蒸馏水定溶至刻度，摇匀冷却后以苯酚-浓硫酸溶液为空白，于波长490nm处测吸光度。

所述步骤（2）振摇2min。

所述步骤（2）于沸水浴中加热15min。

本发明可采用如下仪器与试药。

美国Agilent1200高效液相色谱仪，Alltech3300蒸发光检测器，上海天美UV2300 紫外可见分光光度计。黄芪甲苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110781-200613），甲醇、苯酚、硫酸、正丁醇、亚铁氰化钾、硫酸锌、无水葡萄糖均为分析纯，乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水。

可以理解的是，以上关于本发明的具体描述，仅用于说明本发明而并非受限于本发明实施例所描述的技术方案，本领域的普通技术人员应当理解，仍然可以对本发明进行修改或等同替换，以达到相同的技术效果；只要满足使用需要，都在本发明的保护范围之内。