[发明专利]一种表达羰基还原酶的重组工程菌及其应用

权利要求书

1.一种表达羰基还原酶的重组工程菌，包括宿主细胞和转入宿主细胞的重组载体，所述重组载体由原始载体及插入原始载体的目的基因构成，其特征在于，所述宿主细胞为大肠杆菌(E.coli)Rosetta(DE3)，所述目的基因为羰基还原酶基因，碱基序列如SEQ ID NO.1所示。

2.如权利要求1所述的重组工程菌，其特征在于，所述原始载体为pET-28a(+)。

3.如权利要求1～2任一所述重组工程菌在生产手性药物中间体中的应用，所述手性药物中间体为(S)-氮，氮-二甲基-3-羟基-3-(2-噻吩)-l-丙胺或(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将所述重组工程菌接入培养基，诱导培养后收集菌体细胞；

(2)将菌体细胞悬浮于pH6～7的缓冲液中，加入原料和共底物，反应完成后，分离纯化得到手性药物中间体；

所述原料为氮，氮-二甲基-3-氧代-3-(2-噻吩)-l-丙胺或其盐酸盐、4-氯乙酰乙酸乙酯。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述反应的温度为30～35℃。

6.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述反应的时间为24～48h。

7.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述共底物为葡萄糖。

8.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述原料的浓度为2～5g/L，所述共底物的浓度为5～12g/L，所述菌体细胞的浓度为2～10g/L。