[发明专利]一种检测人外周血淋巴细胞所受电离辐射剂量的方法无效
申请号: | 201210444252.4 | 申请日: | 2012-11-09 |
公开(公告)号: | CN103805682A | 公开(公告)日: | 2014-05-21 |
发明(设计)人: | 刘青杰;张庆召;张德钦;高玲;封江彬 | 申请(专利权)人: | 中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/02;G01N21/64 |
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地址: | 100088 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 人外周血 淋巴细胞 电离辐射 剂量 方法 | ||
1.一种检测人外周血淋巴细胞所受电离辐射剂量的方法,其特征包括如下步骤:
(1)、根据淋巴细胞pig3基因表达序列设计引物和Taqman-MGB探针,构建含有淋巴细胞pig3基因表达序列的重组载体作为标准物质;
(2)、以步骤(1)所述引物和Taqman-MGB探针对10倍系列稀释的标准物质进行实时荧光PCR,绘制绝对定量标准曲线;
(3)、将正常人外周血中分离的淋巴细胞分组接受不同剂量的电离辐射,按照步骤(2)所述实时荧光PCR的方法对辐射后不同培养时间淋巴细胞pig3基因的表达水平定量测定,获得辐射剂量和pig3基因表达水平的拟合剂量效应曲线;
(4)、按照步骤(2)所述实时荧光PCR的方法对待测辐射剂量的人外周血淋巴细胞pig3基因的表达水平定量测定,根据步骤(3)所述的拟合剂量效应曲线计算待测淋巴细胞所受的电离辐射剂量。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)所述的淋巴细胞pig3基因表达序列如SEQ ID NO:1所示。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)所述引物的上游引物如SEQ ID NO:2,下游引物如SEQID NO:3。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)所述Taqman-MGB探针含有如SEQ ID NO:4所示的碱基序列。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)所述Taqman-MGB探针荧光基团为FAM,淬灭基团为NFQ。
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