[发明专利]制备富含牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷提取物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及中草药提取领域，更确切地说涉及一种以山楂叶提取物为原料制备高含量牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷提取物的方法。

背景技术

山楂叶富含黄酮类有效成分，对心脑血管疾病具有广泛而确切的治疗作用。山楂叶提取物中牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷含量较高，两者结构和极性相似，是山楂叶提取物的专属性药理活性成分。中国药典2010年版一部中规定，将牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷作为山楂叶提取物的指纹图谱特征指标成分，规定山楂叶总黄酮提取物中的牡荆素鼠李糖苷需达到8.8%以上。

朱晓新等报道，牡荆素鼠李糖苷可通过稳定心肌细胞膜，减轻其损伤，调节PGs的表达，降低心肌细胞搏动频率等机制保护心肌细胞缺氧再给氧性损伤{中国天然药物，2005，1(1)，45～49}；目前，山楂叶总黄酮制剂已作为治疗心血管药物上市，国内外对山楂叶黄酮类的药理活性及制剂研究还在不断深入，希望从中再开发新药或保健食品，如牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷等为主要原料水解获得的牡荆素作为中药一类新药正在进行开发，开发剂型为注射剂，处于申请临床试验阶段。牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖作为主要有效成分，其水溶性很好，较之其水解产物牡荆素的难溶性，开发注射剂具有明显优势。要进行上述深入开发与研究，需大量的、含高浓度牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷的山楂叶提取物及牡荆素鼠李糖苷、牡荆素葡萄糖苷单体化合物。

然而，山楂叶提取物中组分复杂，包含多种黄酮类、有机酸类成分及未知杂质，与牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷极性相近的成分很多，且牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷属极性较大的成分，无论是对这两个成分的分离或富集均存在很大困难，目前市售山楂叶提取物中的牡荆素鼠李糖苷均低于20%，牡荆素葡萄糖苷低于10%。

专利号为ZL03102024.0、名称为“一种用于治疗心血管疾病的山楂叶注射剂”的发明专利，公开了牡荆素鼠李糖苷的含量为30～50%的山楂叶提取物，其制备方法为：山楂叶用乙醇提取，经大孔吸附树脂处理，再用醋酸乙酯萃取，余液经正丁醇萃取，正丁醇液回收溶剂后干燥而成。该方法存在制备方法复杂，需要同时使用大量的醋酸乙酯和正丁醇，成本较高。

发明内容

为了解决现有技术中山楂叶提取物牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷含量较低，制备方法复杂，有机溶剂使用量大的问题，本发明提供一种制备富含牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷提取物的方法。

本发明另一目的是提供富含牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷的山楂叶提取物在制备药物组合物、牡荆素鼠李糖苷单体、牡荆素葡萄糖苷单体或牡荆素中的应用。

本发明的目的采用如下技术方案实现。

制备富含牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷提取物的方法，其中牡荆素鼠李糖苷的质量百分数为30%～55%，牡荆素葡萄糖苷的质量百分数为10%～35%，该制备方法包括以下步骤：

a.将山楂叶粗提取物的水溶液，过大孔吸附树脂柱或聚酰胺柱，首先用水洗脱杂质，然后用溶剂A洗脱杂质，最后用含有碳酸氢钠或碳酸氢钾的溶剂A洗脱目标成分并收集洗脱液；所述溶剂A为质量百分比浓度为3%～30%的亲水性有机溶剂的水溶液；

b.将步骤a收集的洗脱液用酸调节pH至6～7.5，除去亲水性有机溶剂，获得无有机溶剂的洗脱液；

c、将步骤b所述无有机溶剂的洗脱液用正丁醇或异丁醇萃取目标成分，分取正丁醇或异丁醇层，回收溶剂，干燥后即得富含牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷的提取物；或者将步骤b所述无有机溶剂的洗脱液过大孔吸附树脂柱或聚酰胺柱，用水洗脱盐，然后用溶剂B洗脱目标成分并收集洗脱液，回收洗脱液，干燥后即得富含牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷的提取物；所述溶剂B中亲水性有机溶剂质量百分数为30～100%，水的质量百分数为0～70%。

所述山楂叶粗提取物为山楂叶水提取溶液、水提取湿浸膏、水提取干浸膏、醇提取湿浸膏或醇提取干浸膏；或它们进一步经大孔吸附树脂柱或聚酰胺柱纯化后的总黄酮湿浸膏或总黄酮干浸膏。

所述亲水性有机溶剂为乙醇、甲醇、正丙醇、异丙醇、丙酮、乙腈、四氢呋喃中的一种或两种以上的混合溶剂。

步骤a中所述含有碳酸氢钠的溶剂A中碳酸氢钠的浓度为2～80g/L，所述含有碳酸氢钾的溶剂A中碳酸氢钾的浓度为2～250 g/L。

所述大孔吸附树脂为非极性或弱极性的树脂。

所述大孔吸附树脂的型号为D101、AB-8、HPD-100、HPD-400和X-5。