[发明专利]鲤鲫杂交鱼的选育方法及其远缘杂交品系的建立方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种鱼类的远缘杂交方法，尤其涉及一种以鲤鱼为母本、鲫鱼为父本的远缘杂交方法。

背景技术

杂交技术是改良鱼类性状常用的方法，亲缘关系在种间或种间以上的杂交一般称为远缘杂交。远缘杂交作为一种重要的鱼类遗传育种和性状改良方法，它可以整合整套外源基因，从而改变杂交后代基因的表达调控，使得杂交后代可能在生长速度、抗逆性、抗病性以及肉质等方面表现出杂种优势。如红鲫与湘江野鲤的属间远缘杂交形成的杂交后代具有生长速度快、肉质鲜嫩、抗病力强、存活率高等优点。现今一般的观点认为鲫鱼和鲤鱼间杂交一代是完全不育的，如何利用和改进现有的生物学技术和方法来对现有的自然鱼种进行遗传改良以获得性状更为优良、品种更加丰富和对遗传研究更有意义的新型多倍体鱼，就成为本领域技术人员长期面临和需要解决的问题。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种所获杂交鱼品种优良的鲤鲫杂交鱼的选育方法，还提供一种所获杂交鱼品种优良的鲤鲫杂交鱼远缘杂交品系建立的方法。

为解决上述技术问题，本发明提出的技术方案为一种鲤鲫杂交鱼的选育方法，包括以下步骤：首先，以锦鲤为母本亲鱼，以红鲫为父本亲鱼，对所述父、母本亲鱼先进行人工催产，再进行人工干法授精，将受精卵置于培养皿中进行流水孵化，再对孵化出的鱼苗进行饲养、检测，进而选育出雌性或雄性可育的鲤鲫杂交F₁代个体。

上述鲤鲫杂交鱼的选育方法中，所述母本亲鱼选取两龄以上、无病态、发育良好、性成熟特征明显的锦鲤，所述父本亲鱼选取两龄以上、无病态、发育良好、性成熟特征明显的红鲫；所述父、母本亲鱼在进行人工催产前，先放入亲鱼池内人工精养3～4个月。

上述鲤鲫杂交鱼的选育方法中，所述人工催产的具体操作步骤优选包括：在4月初至5月下旬，水温维持在20℃～26℃，对母本亲鱼先注射绒毛膜促性腺激素（HCG）与黄体素释放激素类似物（LRH-A）的混合液催产，其中绒毛膜促性腺激素的用量为600IU/kg～800IU/kg，黄体素释放激素类似物的用量为10ug/kg～20ug/kg；再对父本亲鱼注射绒毛膜促性腺激素与黄体素释放激素类似物的混合液，相比母本亲鱼，其注射剂量减半；然后按1∶（5～10）的数量比将注射后的母本亲鱼、父本亲鱼放入同一产卵池（水面面积为80 m²左右）中，然后向产卵池中冲水（视水情及时向池中冲水，尤其在产卵前3h～4h），注入一定水量后停止冲水并让父、母本亲鱼在静水中催产，直至其开始顺利产卵和产精。

上述的鲤鲫杂交鱼的选育方法中，所述检测过程包括利用流式细胞测定DNA含量以及利用肾细胞染色体制备工艺检测饲养后鲤鲫杂交鱼的染色体倍性。

上述本发明的技术方案中，锦鲤与红鲫的属间远缘杂交形成的杂交后代F₁除具有生长速度快、肉质鲜嫩、抗病力强、存活率高等优点外，体背还明显增高，头部颜色金灰相间，鳞片外缘呈金黄色，背部呈整齐的金黄色，是一种外形优美、体色独特、具有良好观赏价值及应用前景的杂交鱼。更重要的是，传统观点认为鲫鱼和鲤鱼间杂交一代是完全不育的，但通过采用本发明的上述选育方法，我们在杂交F₁代的雌性和雄性群体中稳定地获得了可育的个体，并且通过后续的研究发现，前述杂交F₁代的可育个体经过自交可稳定制备鲤鲫杂交二倍体F₂代，这为后续异源四倍体鱼的培育奠定了坚实的基础。

作为一个总的技术构思，本发明还提供一种鲤鲫杂交鱼远缘杂交品系的建立方法，将上述选育方法获得的鲤鲫杂交F₁代中的雄性杂交鱼和雌性杂交鱼进行自交，培育得到鲤鲫杂交F₂代。通过鲤鲫杂交F₁自交可以稳定获得鲤鲫杂交F₂代，经过我们的检测研究发现，鲤鲫杂交F₂代同样两性可育。通过对F₂进行自交，有望在其后代F₃中发现两性可育并可稳定遗传的四倍体，利用异源四倍体鲫鲤与二倍体杂交，则有望制备具有生长速度快、抗逆性强、不育的三倍体鲫（鲤）鱼，可见，鲤鲫杂交鱼远缘杂交品系的建立将具有明显的经济效益和社会效益。

上述的鲤鲫杂交鱼远缘杂交品系的建立方法，所述自交的具体方法为：将两龄以上的所述雄性杂交鱼和雌性杂交鱼放入亲鱼池内，先进行人工催产，再进行人工干法授精和流水孵化，最后进行饲养，直至鱼苗长成后经检测获得鲤鲫杂交F₂代二倍体鱼。