[发明专利]用于免疫吸附反应过程中抗体在固相载体上固定的方法无效
申请号: | 201210450645.6 | 申请日: | 2012-11-12 |
公开(公告)号: | CN102914645A | 公开(公告)日: | 2013-02-06 |
发明(设计)人: | 齐兵玉;李学斌;朱峰胜 | 申请(专利权)人: | 武汉伊艾博科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543 |
代理公司: | 武汉开元知识产权代理有限公司 42104 | 代理人: | 唐正玉 |
地址: | 430074 湖北省武汉市东湖开发区关*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 免疫 吸附 反应 过程 抗体 载体 固定 方法 | ||
1.用于免疫吸附反应过程中抗体在固相载体上固定的方法,其特征在于按以下步骤进行:在固相载体上预先包被抗FITC的抗体,在4-6℃反应8-12小时;然后封闭固相载体上未反应位点,在34-37℃反应1-2小时;再加入FITC标记的抗体,在34-37℃反应1-2小时或4-6℃反应8-12小时,完成对固相载体的包被过程。
2.根据权利要求书1所述的方法,其特征在于:所述的固相载体材料为聚苯乙烯、聚氯乙烯、PVDF膜、纤维素、凝胶或免疫磁珠。
3.根据权利要求书1或2所述的方法,其特征在于按以下步骤进行:1), 选择多孔固相载体一块;
2), 预包被:用摩尔浓度为0.05mol/L、pH=9.5的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液为包被液将兔抗FITC抗体稀释成1.0 μg/mL,每孔加入100μ.L,4-6℃反应8-12小时;
3), 封闭:倾去包被液,然后每孔加入以质量浓度为1%牛血清白蛋白BSA溶液作为封闭液,250μL/孔,34-37℃反应1小时;
4), 包被目的抗体:用摩尔浓度为0.01mol/L 、pH=7.2的三羟甲基氨基甲烷-醋酸洗涤液稀释FITC标记的目的抗体,浓度为0.05ug/mL,每孔加入100μL,4-6℃反应10小时或者34-37℃反应2小时;
5), 洗板:以摩尔浓度为0.01mol/L、pH=7.2 的三羟甲基氨基甲烷-醋酸洗涤液洗板2-5次,完成对固相载体的包被过程。
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