[发明专利]一种测定罗氟司特原料及其杂质含量的反向高效液相色谱法

说明书

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，涉及一种测定罗氟司特原料及其杂质的方法，特别涉及一种测定罗氟司特原料及其杂质含量的反向高效液相色谱法。

背景技术

罗氟司特（Roflumilast），化学名为3-环丙基甲氧基-N-(3,5-二氯吡啶-4-基)-4-二氟甲氧基苯甲酰胺（3-cyclopropylmethoxy-N-(3,5-dichloropydin-4-yl）-4-（difluoromethoxy）benzamide），是德国Altana公司开发的磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂，2010年7月经欧盟批准首次于德国上市，临床用于治疗慢性阻塞性肺病(COPD)，商品名Daxas，2011年3月经美国FDA批准上市。慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种严重的致残、致死性疾病，已造成沉重的社会经济负担，本品通过抑制PDE4减少炎症介质的释放，进而抑制如COPD和哮喘等呼吸道疾病对肺组织造成的损伤[韩伟，周新. 慢性阻塞性肺疾病的治疗新选择——罗氟司特. 《世界临床药物》2011，32（7）：396-399；马培奇. 慢性阻塞性肺病治疗新药罗氟司特.《上海医药》2011，32（4）： 201-202；封宇飞. 磷酸二酯酶-4抑制剂罗氟司特的药理与临床研究新进展.《中国新药杂志》2011， 20（14）：1257-1260, 1265页]。因此，合成罗氟司特原料，制成相应的制剂具有重大的医学意义。

目前，国内对罗氟司特含量和有关物质的测定方法未见报道，国外对罗氟司特含量和有关物质的测定主要是高效液相色谱法[V. D. Barhate and P. C. Deosthalee. Validation of Rapid liquid Chromatographic Method for the Determination of Roflumilast. J. Chem. Pharm. Res., 2011,3(2): 770-775；V. D. Barhate and P. C. Deosthalee. Indian Journal of Pharmaceutical Sciences, 2010,72 (3), 401-404.]，其色谱条件如下：色谱柱为ZORBAX, SB-C18, 1.8μm, 50mm×4.6mm(ID)；流动相采用的是乙腈和甲酸铵缓冲盐（PH3.5）梯度洗脱程序，其中流动相比例变化为5个；流速为0.5 mL/min；柱温25℃；检测波长为UV210nm；进样量为3μl。但其所用液相方法分离的杂质不多，而色谱条件却较苛刻，不利于一般实验室或药厂推广应用。

发明内容

鉴于现有技术的不足，本发明的目的在于通过大量试验对罗氟司特原料及制剂的分析方法进行研究，从而提供一种测定罗氟司特原料及其杂质含量、罗氟司特制剂及其有关物质含量、罗氟司特制剂溶出度的反向高效液相色谱法。

本发明的目的是这样实现的：

一种测定罗氟司特原料及其杂质含量的反向高效液相色谱法，其中反向高效液相色谱采用的流动相采用极性有机溶剂、水、冰乙酸体积比为40-60：40-60：0.05-0.5的混合液。

优选地，所述测定罗氟司特原料及其杂质含量的反向高效液相色谱法，其中反向高效液相色谱采用的流动相采用极性有机溶剂、水、冰乙酸体积比为52：48：0.1的混合液。

进一步优选地，所述测定罗氟司特原料及其杂质含量的反向高效液相色谱法，其中所述极性有机溶剂为甲醇或/和乙腈。

进一步优选地，所述测定罗氟司特原料及其杂质含量的反向高效液相色谱法，其中所述极性有机溶剂为乙腈。

再进一步优选地，所述测定罗氟司特原料及其杂质含量的反向高效液相色谱法，其中反向高效液相色谱条件为：

色谱柱：ZORBAX, SB-C18, 5μm, 250×4.6mm(ID)；

流动相：乙腈：水：冰乙酸=52:48:0.1；

流速：1.0mL/min；

柱温：40℃；

检测波长：UV210nm；

进样量：20-100 μl。

与现有技术相比，本发明涉及的反向高效液相色谱法具有如下优点和显著的进步：简便快捷，灵敏度高，准确性好。经试验，相关系数均在0.999以上。样品检测专一性强，各项方法学指标均可满足罗氟司特原料或制剂的检测需要。

附图说明

图1为罗氟司特各中间体及其混合物的色谱分离图。