[发明专利]应用膜分离和全二维气相色谱-飞行时间质谱快速检测中药中农药多残留的方法

说明书

技术领域

本发明属于食品安全技术领域，涉及一种应用膜分离和全二维气相色谱-飞行时间质谱快速检测中药中农药多残留的方法。

背景技术

我国是中药种植、使用及出口大国，其药用功效越来越得到国内外消费者的认可。近年来由于种植不当、环境污染或利益驱动，人工种植中药不断出现农药残留污染问题，成为影响药物疗效和安全性的重要因素,对人类和环境造成的危害也是不容忽视的，近年来国内外对中药农药残留的关注度呈上升趋势，目前欧美、日本、韩国等国家都对中药中的农药残留制定了严格的限量标准，对我国中药出口造成技术壁垒。因此建立快速准确的中药中农药残留的检测方法是很有必要的。

现在中药中的农药残留的检测主要有气相色谱法、液相色谱法以及气相色谱-质谱法，液相色谱-质谱法，气相色谱-串联质谱和液相色谱-串联质谱法，气相色谱法和液相色谱法主要依赖色谱分离，针对复杂基质如各种中药，在农药的定性上存在一定难度，基质中的干扰峰与待测农药不能有效分离，干扰结果的准确性，甚至造成假阳性。气相色谱-质谱法和液相色谱-质谱法主要利用低分辨质谱检测器，由于受到扫描速度的限制，在农药多残留的分析上灵敏度会不理想，气相色谱-串联质谱法和液相色谱-串联质谱法在农药多残留的定量分析上具有较高的灵敏度，适合分析目标化合物；在对复杂基质的分离和未知物的筛选及定性定量上，近年来发展较快的二维气相色谱-飞行时间质谱(TOFMS)技术具有优势，气相色谱采用两支极性不同的色谱柱，当样品经过第一支非极性柱时，待测组分按分子大小进行分离，在一维色谱柱上未分开的组分在调制解调器的作用后进入第二支极性色谱柱，一维相同保留时间的组分在第二支色谱柱上按极性再次分离，实现了样品组分的正交分离，强度在三维谱图上显示，得到三维谱图。TOFMS可提供非常高的采集频率，这使得在GC×GC上重叠峰得以分辨，并自动解析。该方法具有较高的分辨率、灵敏度，提高了农药在定性和定量上的准确性和可靠性，解决了复杂基质如中药的分离及同时定性和定量的难题。

目前国内涉及中药中农药残留的检测标准很少，2010年修订颁布的新版《中华人民共和国药典》中涉及了中药中二十多种农药的检测方法，多为气相色谱法，国标gb／t23200-2008桑枝、金银花、枸杞子和荷叶中488种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱-质谱法，gb／t 23201-2008桑枝、金银花、枸杞子和荷叶中413种农药及相关化学品残留量的测定液相色谱-串联质谱法涉及了多残留农药的检测，但方法仅适用于基质比较简单的桑枝、金银花、枸杞子和荷叶四种中药，而应用二维气相色谱-飞行时间质谱检测中药中的多残留农药还研究很少。

中药中农残前处理方法主要有溶剂提取、加速溶剂萃取、液液分配、固相微萃取等，这些方法存在耗时长、试剂消耗量大、待测物回收不稳定、易分解、固相微萃取造价高等问题。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种快速、简便，灵敏度高、分离效果好，有效减少来自复杂的中药基质干扰的应用膜分离和全二维气相色谱-飞行时间质谱快速检测中药中农药多残留的方法。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种应用膜分离和全二维气相色谱-飞行时间质谱快速检测中药中农药多残留的方法，包括以下步骤：

1）中药样品中农药残留的乙腈提取；

2）氧化铝无机膜的超滤分离；

3）样品提取溶液的固相分散萃取净化；

4）使用二维气相色谱-飞行时间质谱检测；

5）结果分析。

具体地说，包括以下步骤：

1）中药样品中农药残留的乙腈提取

称取1～2g中药粉末样品，加入2～4mL蒸馏水使中药润湿，加入10mL乙腈，剧烈震摇，得到由中药基质、水、乙腈组成的混合匀浆溶液，在上述匀浆溶液中加入1g氯化钠固体，再剧烈震摇，然后进行离心操作，静置分层，取出上清液，离心管中再加10mL乙腈，重复提取一次，合并2次提取液；

2）氧化铝无机膜的超滤分离

氧化铝无机膜膜厚0.02～0.2um,固定于溶液过滤接收装置上，加样前先用乙腈润湿，真空抽滤，弃去接收器中的乙腈，加入提取液，真空抽滤至膜面近干，再加入10mL乙睛抽滤洗膜，接收液转入旋转蒸馏瓶中旋转蒸发近干，加入1mL丙酮于蒸馏瓶中溶解待测样品；

3）样品提取溶液的固相分散萃取净化