[发明专利]一种木通皂苷D的富集和纯化方法

权利要求书

1.一种用HP-20大孔树脂富集续断药材提取液中木通皂苷D的方法，其特征在于包括以下步骤：将用95%的乙醇浸泡后的HP20大孔树脂，用95%乙醇洗脱，再用水洗脱至无醇味后备用；所用柱子的径高比为1：6，上样液浓度为0.1g药材/ml，上样量为药材：湿树脂重量比=1:1.5~2.5，依次用水、30%乙醇和35%乙醇除杂，然后用50%乙醇洗脱，得到木通皂苷D富集液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的用水除杂为中性的纯化水、或用pH=3-4的酸性纯化水、或用pH=7-8的碱性纯化水、或用pH=8-9的碱性纯化水、或用pH=9-10的碱性纯化水单独使用除杂，或者pH=3-4的酸性纯化水与pH=8-9的碱性纯化水联合使用除杂；所述的用30%乙醇除杂为中性的30%乙醇、或用pH=3-4的酸性30%乙醇、或用pH=7-8的碱性30%乙醇、或用pH=8-9的碱性30%乙醇、或用pH=9-10的碱性30%乙醇单独使用除杂，或用pH=3-4的酸性30%乙醇与pH=8-9的碱性30%乙醇联合使用除杂；所述的35%乙醇为中性的35%乙醇；所述的50%乙醇为中性的50%乙醇。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于除杂时所述水的用量为6倍量柱体积，所述30%乙醇的用量为6倍量柱体积，所述35%乙醇的用量为2倍量柱体积，洗脱时所述50%乙醇的用量为6倍量柱体积。

4.根据权利要求1~3中任意一项所述的方法，其特征在于所述除杂和所述洗脱的过程为：用6倍量柱体积的pH=8-9的碱性纯化水洗脱除杂，流速为2BV/h；然后用6倍量柱体积的pH=8-9的碱性30%乙醇洗脱除杂，流速为2BV/h；再用2倍量柱体积的中性的35%乙醇除杂，流速为2BV/h；最后用6倍量柱体积的中性的50%乙醇洗脱，流速为2BV/h，得到木通皂苷D富集液。

5.一种木通皂苷D富集液的纯化方法，其特征在于向木通皂苷D富集液中加入有机溶剂制成纯化前溶液，向纯化前溶液中加入1倍体积量的石油醚，充分振摇，密闭，冷藏静置过夜，抽滤，收集沉淀，于不超过70℃的温度下减压干燥，即得木通皂苷D纯化物。

6.根据权利要求5所述的木通皂苷D富集液的纯化方法，其特征在于所述的纯化前溶液中有机溶剂的体积百分含量为5%~40%，优选为10%~30%，更进一步优选为20%。

7.根据权利要求5或6所述的木通皂苷D富集液的纯化方法，其特征在于所述的有机溶剂为乙醇、甲醇 、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯或正丁醇；优选为乙醇或丙酮，更进一步优选为丙酮。

8.根据权利要求5所述的木通皂苷D富集液的纯化方法，其特征在于所述的纯化前溶液中药材与纯化前溶液的质量体积比g：ml为1:0.5~3；优选为：1:1。

9.根据权利要求5所述的木通皂苷D富集液的纯化方法，其特征在于所述的木通皂苷D富集液为采用权利要求1所述的方法制备的木通皂苷D富集液，或者采用24种大孔树脂D101、HPD-100、HPD-100A、HPD-200A、AB-8、Seplite D101、Seplite LX-68、Seplite XDA-8、Seplite LX-11、Seplite LX-17、Seplite LX-28、HPD-200A、HPD-200B、HPD-300、HPD-400、HPD-400A、HPD-450、HPD-450A、HPD-500、HPD-600、HPD-700、HPD-710、HPD-722或HPD-721富集方法制备的木通皂苷D富集液。