[发明专利]一株地衣芽孢杆菌及其菌剂的生产方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及一株拮抗植物病原菌、促进植物生长的地衣芽孢杆菌，及其低成本生产方法，属于微生物农药和微生物肥料技术领域。

背景技术

地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）在自然界中分布广泛，是一种重要的生防菌，它通过产生抗生素、抗菌蛋白或多肽等活性物质来抑制植物病原细菌、真菌、病毒、线虫，从而起到生物防治的作用；同时它也是一类重要的植物根际促生细菌，表现出对多种植物促进生长的作用。例如，中国发明专利（申请号：200310115535.5）中公开了一株地衣芽孢杆菌B-0A12菌株，保藏编号为CGMCC No. 1035，用于防治大豆胞囊线虫病和镰刀菌引起的根腐病，该菌株发酵培养过程中使用的培养基为：可溶性淀粉1-2%，豆饼粉1-2%，牛肉膏0.5-1.0%，葡萄糖0.1-0.5%，还有少量无机盐，发酵结束时细菌含量为7×10⁸个/毫升。中国发明专利（申请号：200810026137.9）中公开了一株植物内生地衣芽孢杆菌R21菌株，保藏编号为CCTCC M 207113，具有广谱拮抗植物病原真菌能力、解磷能力和促进植物生长能力，其发酵采用了LB培养基，并公开了其防治西芹黄萎病、香蕉枯萎病，以及促进西芹生长方面的应用。中国发明专利（申请号：200810183072.9）中公开了一株地衣芽孢杆菌201菌株，保藏编号为CCTCC No. M207092，该菌株对香蕉枯萎病、西瓜枯萎病、番茄枯萎病、香蕉炭疽病、小麦赤霉病等多种病原真菌具有拮抗作用，该菌株的培养采用牛肉膏蛋白胨培养基。中国发明专利（申请号：200810183075.2）中公开了一株地衣芽孢杆菌202菌株，保藏编号为CCTCC No. M207093，它也具有与201菌株类似的生防功能。

地衣芽孢杆菌在工业上的应用也比较广泛。例如，中国发明专利（申请号：200810227858.6）中公开了一株地衣芽孢杆菌U1-3菌株，保藏编号为CGMCC No. 2437，该菌株在采油工程领域中可以用来驱油，提高石油采收率，其培养基采用了液体石蜡、酵母粉和多种无机盐。中国发明专利（申请号：200810055068.4）中公开了一株地衣芽孢杆菌WX-02菌株，保藏编号为CCTCC No. M208065，用于生产聚γ-谷氨酸，其培养基采用了谷氨酸钠，碳源（淀粉或淀粉水解液、葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖中的一种），无机氮源和其他多种无机盐。中国发明专利（申请号：200810026812.8）中公开了一株地衣芽孢杆菌HM-3菌株，保藏编号为CGMCC No. 1970，用于生产碱性蛋白酶，培养基采用了酵母膏、蛋白胨和城市污泥。中国发明专利（申请号：200610053548.8）中公开了一株地衣芽孢杆菌B-05571菌株，保藏编号为CCTCC No. M206082，用于将甘油转化为二羟基丙酮，培养基以甘油为主要碳源，还有酵母粉、蛋白胨、牛肉膏、多种无机盐。

综上所述，具有拮抗植物病害的地衣芽孢杆菌的菌株较多，其培养方法也各不相同，但是，未见用于茶叶生产的菌株，也未见采用甘薯淀粉废水培养地衣芽孢杆菌的报道。

发明内容

本发明的目的是提供一株高效拮抗植物病原菌、促进植物生长的地衣芽孢杆菌，并提供一种能够资源化利用甘薯淀粉废水生产地衣芽孢杆菌微生物菌剂的方法，以及菌剂在茶叶和蔬菜生产中的应用。

本发明所使用的菌株是由发明人从水草根际土壤中分离筛选出来的一株高效促进植物生长、拮抗植物病原菌的地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）B4菌株，该菌株于2012年10月15日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No. 6677，保藏单位地址：北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所，邮编：100101。

本发明所述的地衣芽孢杆菌微生物菌剂的生产方法如下：

1、甘薯淀粉废水预处理：用氢氧化钠水溶液或石灰水调节废水的pH到6.5～7.8，于110～126℃灭菌10～35分钟。

2、液体种子制备：向装有预处理好的甘薯淀粉废水的三角瓶中接种斜面保藏的地衣芽孢杆菌，于25～37℃，120～200转/分振荡培养24～36小时，得到液体种子。