[发明专利]一种海参养殖用麦饭石载体芽孢杆菌剂

权利要求书

1.一种海参养殖用麦饭石载体芽孢杆菌剂，其特征在于：有以下组分按质量份数配比组成，

芽孢杆菌剂与麦饭石的质量比为1:1~4；

芽孢杆菌剂由芽孢杆菌混合物与营养饲料组成，其重量比为1：20~100，其中：

所述的营养饲料为：黄粉虫沙50～70份；马尾藻粉：25～40份；海蒿子15～35；大豆蛋白10～15份；鱼粉：5～10份；螺旋藻2～5份；贻贝粉2～5份；低聚壳聚糖：1～4份；复合多维1～4份；复合多矿1～4份。

2.根据权利要求1所述的海参养殖用麦饭石载体芽孢杆菌剂，其特征在于，所述的芽孢杆菌混合物由以下方法制备：

（1）增菌：从芽孢杆菌标准菌株的单一菌落中，挑菌接种到芽孢杆菌培养基中，30~35℃条件下，100～200rpm振荡培养12h后，再以3-5%的体积比接种芽孢杆菌混合物，进行发酵，30~35℃条件下，100～200rpm振荡培养24~48h，至菌悬液菌含量的终浓度为10⁷~10¹⁰cfu/g；制得发酵产物；

（2）洗涤：将步骤（1）获得的发酵产物，以4000~8000rpm转数离心2~5min，以收集菌体；以50倍质量的PBS缓冲液混合，充分搅拌1~5min后，收集混合液；

（3）益生菌配比：将收集的混合液；按1:1的质量比加入大豆粉，再混合均匀；

（4）干燥：上述步骤（3）所得的混合物与营养饲料混合，混合物与营养饲料总重量比为1：2~10，干燥24~36h，产物水份含量为2~5%，制得芽孢杆菌剂；

（5）向步骤（4）所得到的芽孢杆菌剂中，按照1~4倍质量，加入麦饭石，充分混合均匀后球磨，球磨条件为：按10~30：1的质量比装入钢球和沉淀物；球磨转速设为350~450r/min，球磨时间为2~4h，使得终产物的产品粒度为纳米级。

3.根据权利要求2所述的海参养殖用麦饭石载体芽孢杆菌剂，其特征在于，步骤（1）还包括菌种复苏的步骤：芽孢杆菌标准菌株菌落接种在芽孢杆菌混合物中，30~35℃条件下，100～200rpm振荡培养12h。

4.根据权利要求3所述的海参养殖用麦饭石载体芽孢杆菌剂，其特征在于，所述的芽孢杆菌培养基，其配制方法如下：

①取葡萄糖8~10g，蔗糖10~20g，酵母膏4~6g，胰蛋白胨5~10g,牛肉膏4-6g，氯化钙0.2~2g，，氯化钠0.4-0.8g，氯化镁1~2g，硫酸镁0.1~1g蒸馏水1000mL，121℃下灭菌20min；

②待所述培养基逐渐冷却后，调节所述溶液的pH至5.0~7.0，冷却备用。