[发明专利]一种植物与微生物多糖的纯物理制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物与微生物多糖的制备方法，具体地说是一种提取植物与微生物多糖的纯物理制备方法。

背景技术

    多糖是由二十多个单糖到上万个单糖通过糖苷键连接成的一类重要的大分子物质，生物活性多糖主要分为植物多糖、微生物多糖、动物多糖，其作为一种重要的生物体内大分子，与核酸和蛋白质一样与生物体的机能密切相关。越来越多的研究表明多糖具有抗肿瘤、抗衰老、抗菌、抗氧化、降血糖和调节免疫等功能，因此，多糖具有较好的开发价值和应用价值。而多糖提取工艺一直是研究者关注的重点，针对目前多糖传统提取工艺的缺陷，本发明提供了一种针对植物多糖与微生物多糖的纯物理制备方法，由于发明中涉及超滤膜的选择，且根据生物种类的不同，多糖分子量呈现出较大差异，分子量范围可由几千到几十万，为获得一定分子量范围的活性多糖，孔径较大的超滤膜截留分子量大于植物或微生物活性多糖分子量的2-5倍，孔径较小的超滤膜截留分子量为植物或微生物活性多糖分子量的1/5-1/2。例如本发明选取植物材料：九华山多花黄精（活性多糖分子量8.9KDa）、霍山细茎石斛（活性多糖分子量28KDa），微生物材料：福建古田猴头菇（活性多糖分子量20KDa）、白茯苓（活性多糖分子量10-40KDa）为代表材料，超滤膜分子量范围为3-50KDa。

        目前多糖的提取方法主要采用水提醇沉法，而水提醇沉法存在诸多缺点，例如CN 101255199 A公开了“一种从黄精中提取黄精多糖的方法”，该方法将黄精加热煎煮0.5-1.5小时，提取多次，醇沉12-36小时，得黄精多糖。该工艺提取时间长，高温煎煮对多糖结构造成破坏，醇沉过程只能作为粗略分级，且消耗大量酒精，增加了生产成本，难以达到高效、绿色工业化生产需求。CN 101698684 A（一种从人参中提取多糖的方法及应用）和CN 101613418 A（一种提取双胞蘑菇多糖的方法）等所述，都采用sevage法脱蛋白，需用大量有毒试剂氯仿与正丁醇，操作繁琐，多糖损失严重；醇沉与除蛋白后得到的多糖由于有机试剂的残存，更不能直接应用于食品、医药等领域，而且废液排放还造成环境污染。因此，常规水提醇沉法已日益不适于当今工业化生产需求。本发明采用高压均质技术与超滤技术联用提取多糖，两种技术的联用至今未见文献报道。高压均质技术已广泛应用于食品行业的物料细化与乳化，采用高压均质技术对物料进行超微粉碎，使多糖更容易渗透与扩散，提取率升高，均质过程只需5-10分钟，耗时短，高压均质法提取的同时可将与多糖结合的蛋白分离，脱蛋白效果显著。超滤技术兼有分离、浓缩的功能，具有操作简单、无相变、能对特定分子量范围多糖分离等特点。本发明不使用任何有机试剂，两种技术联用为天然活性多糖提取提供了一条高效、简洁、绿色环保的物理制备方法，非常适合工业化生产，具有广阔的应用前景。

发明内容

本发明目的在于提供一种提取植物与微生物多糖的纯物理方法，所要解决的问题是通过高压均质技术与超滤技术的联用，使多糖提取率升高，耗时缩短，蛋白含量降低，提取过程无污染。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

植物与微生物多糖的纯物理制备方法，包括以下步骤：

（1）将植物或微生物样品前处理，烘干，根据物料软硬程度，用粉碎机粉碎2-4次，每次30-50秒，得样品粉，将样品粉过60-80目筛；

（2）称取步骤（1）所得粉末放于容器中，加入10-30倍水，搅拌混匀；

（3）调节低温循环泵温度，设置上下限温度，保证高压均质机内部工作温度为4~10℃；

（4）将步骤（2）所得混合物料倒入均质机中，物料首先在低压强5-10MPa条件下循环2-4次，然后调节阀门压强为20-100MPa，待压强稳定后，均质1-3次；

（5）将步骤（4）所得均质液离心15-22min，收集上清液，残渣烘干保存；

（6）将步骤（5）得到的上清液进行超滤分离，分为一次超滤和二次超滤，分别设置两次超滤条件；

（7）一次超滤选用截留分子量大于样品活性多糖分子量2-5倍的超滤膜进行分离，保留透过液，去除截留液；

（8）将步骤（7）所得样品透过液进行二次超滤，超滤膜截留分子量为样品活性多糖分子量的1/5-1/2,保留截留液；

（9）将步骤（8）所得截留液浓缩到原体积的1/9-1/10，冷冻干燥即得样品活性多糖；

（10）检测样品多糖蛋白含量与糖含量。

所述的步骤（1）中烘干温度为40~45℃。