[发明专利]以常春藤皂苷元为有效成分的药物及其在药物方面的应用

说明书

技术领域

本发明涉及以常春藤皂苷元为有效成分的药物，及其在药物方面的应用，更具体地提供了其在抗肿瘤药物方面的应用。 

背景技术

常春藤皂苷元，为加科常春藤属植物中华常春藤

HederanepalensisK.Kochvar.sinensis（Tobl.）Rehd.所含主要成分，具有吸湿性、味苦、刺激黏膜的作用，一般可溶于水,易溶于热水、热甲醇及热乙醇,不溶于乙醚等极性小的有机溶剂。本发明人经过研究，发现常春藤皂苷元具有抗肿瘤作用。

发明内容

本发明提供了以常春藤皂苷元为有效成分的药物。 

本发明提供了包含常春藤皂苷元的药物组合物，该组合物可以是常春藤皂苷元与药学上可接受的辅料或其它药物联合制备而成。 

本发明提供了常春藤皂苷元在药物方面的应用。 

本发明提供了常春藤皂苷元在制备抗肿瘤药物方面的应用。 

本发明提供的化合物的制备方法可以根据ZL200710146725.1中所述制备方法制备。本发明提供的含有常春藤皂苷元化合物的药物，可以通过将化合物添加药学上可接受的辅料或可选的其它成分而制成适于临床使用的药物组合物。 

本发明的化合物在制备治疗肿瘤药物中的应用，是通过以下的药效实验得到证实的。 

具体实施方式

实验例1：常春藤皂苷元对体外肿瘤细胞的抑制作用 

材料和试剂

药物及试剂：常春藤皂苷元，按照ZL200710146725.1中所述制备方法制备。注射用硫酸长春新碱 ,上海华联制药有限公司，1mg/支。RPMI1640培养基：GIBCO公司生产；新生牛血清（超级），杭州四季青生物工程材料有限公司。胰蛋白酶，Sigma公司生产；磺基罗丹明B（sulforhadamine B, SRB），Sigma公司；注射用链霉素，山东瑞阳制药有限公司，1g（100万单位）/支；注射用青霉素钠，山东鲁抗医药股份有限公司，80万单位/支。其它常用化学试剂为国产分析纯。

细胞株：人肝癌细胞株SMMC-7721、Bel-7402、人卵巢癌细胞株HO8910、人前列腺癌胞PC-3M、人肺腺癌细胞株A549、人结肠癌细胞株HCT-8、人食管癌细胞株CaEs-17、人脑胶质瘤细胞株U251、人胃癌细胞株BGC-823、人胃腺癌细胞株SGC-7901，均购自中国医学科学院北京肿瘤研究所药理室。 

仪器：CO2培养箱，超净工作台，酶标仪，倒置显微镜，细胞培养瓶（Costar, USA），96孔细胞培养板（Costar, USA）。 

软件：Microsoft Excel 7.0 统计分析软件；Microcal Origin 6.0数据处理软件。 

实验方法

药物及试剂配制：

RPMI1640培养基一袋加水一升，补加2克碳酸氢钠，10万单位青霉素和100mg链霉素，调节pH值至7.4，用0.22μm除菌滤膜过滤除菌。90ml培养基加灭活新生牛血清10ml即为完全培养液。胰蛋白酶用D-hanks缓冲液配成0.25%溶液后过滤除菌。

准确称取常春藤皂苷元20.0 mg于灭菌离心管中，加入DMSO 1ml，配成20 mg/ml原液。取10 μl原液加到10ml的完全培养液中，即成为20 μg/ml应用液，再分别用完全培养液稀释为10、5、2.5和1.25μg/ml的应用液。 

细胞培养及传代： 

所有细胞均贴壁培养于含10ml完全培养液细胞培养瓶中，于37℃、5%CO₂、饱合湿度下培养。细胞长满瓶底后用灭菌D-hanks液洗两次，加0.25%胰蛋白酶消化细胞2分钟，倒掉胰蛋白酶，待轻摇细胞能完全脱落后，加完全培养液30ml后，用移液管吹散细胞，分装于3个新的细胞培养瓶中，继续培养。