[发明专利]增强CIK细胞增殖能力及提高杀死肿瘤细胞的方法无效
申请号: | 201210477047.8 | 申请日: | 2012-11-22 |
公开(公告)号: | CN102978159A | 公开(公告)日: | 2013-03-20 |
发明(设计)人: | 李晓祥;沈政;黄谋珍 | 申请(专利权)人: | 深圳市中美康士生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783 |
代理公司: | 深圳冠华专利事务所(普通合伙) 44267 | 代理人: | 诸兰芬 |
地址: | 518167 广东省深圳市南*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 增强 cik 细胞 增殖 能力 提高 杀死 肿瘤 方法 | ||
1.增强CIK细胞增殖能力及细胞毒作用的方法,包括无菌采集并分离健康人外周血单个核细胞,其特征在于:将得到的单个核细胞用Q007培养基重悬细胞,加入24-26ug/ml的PHA-L型植物血凝素,并在培养基中至少培养15天。
2.根据权利要求1所述的增强CIK细胞增殖能力及细胞毒作用的方法,其特征在于,PHA-L型植物血凝素的用量为25ug/ml。
3.根据权利要求1所述的增强CIK细胞增殖能力及细胞毒作用的方法,其特征在于,用Q007培养基重悬细胞后调整细胞密度在(2-3)*106个/ml。
4.根据权利要求2所述的增强CIK细胞增殖能力及细胞毒作用的方法,其特征在于,所述培养基为含有重组人IFN-γ、重组人IL-1以及重组人IL-2的培养基,其培养方法为,在第0天加入250IU/ml的重组人IFN-γ,在第1天加入25ug/ml的PHA-L型植物血凝素和2.5ng/ml的重组人IL-1,在第2天加入1000IU/ml的重组人IL-2进行培养。
5.根据权利要求4所述的增强CIK细胞增殖能力及细胞毒作用的方法,其特征在于,在培养过程中每隔2-3天加入一次1000IU/ml的新鲜重组人IL-2。
6.根据权利要求1所述的增强CIK细胞增殖能力及细胞毒作用的方法,其特征在于,将得到的单个核细胞经洗涤后用Q007培养基重悬细胞。
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