[发明专利]一种大麦蛋白HvMYB6及其编码基因与应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种大麦蛋白HvMYB6及其编码基因与应用。

背景技术

大麦白粉病（Powdery mildew）是大麦主要病害之一,发生在潮湿和半潮湿地区,分布于世界各产麦国。在欧洲是最普遍的破坏性病害,大流行年份可造成减产25%～30%。在日本及北美的东部和南部地区、中国的贵州、四川及东南沿海麦区普遍发生,可造成20%以上的产量损失。在福建则是大麦主要病害。该病可侵害大麦植株地上部各器官，但以叶片和叶鞘为主，发病重时颖壳和芒也可受害。由于大麦白粉病菌具有群体大、适应范围广、生理小种众多，且变异速度快，使得许多有效抗病基因丧失抗性。目前育种工作者一直以选育和推广抗病品种作为病害的主要防治手段，多年来颇见成效，但抗性丧失一直是未能解决的问题，抗源多样化是实现抗病性持久的有效途径。为此通过生物学的方法克隆新的抗病基因，利用转基因的方法提高大麦对白粉病的抗性是今后防治白粉病的有效策略之一。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种大麦蛋白HvMYB6及其编码基因。

本发明提供的蛋白，是如下（a）或（b）：

（a）由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

（b）将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与抗病相关或具有转录激活活性的由序列2衍生的蛋白质。

上述（a）或（b）中的蛋白可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。上述（b）中的蛋白的编码基因可通过将序列表中序列1所示的DNA序列缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变，和/或在其5′端和/或3′端连上表2所示的标签的编码序列得到。

上述蛋白的氨基酸序列中一个或几个氨基酸残基的取代、替换和/或添加，有的是由于自然发生的变异引起的，有的是由人工诱变处理引起的。

编码上述蛋白的基因也是本发明保护的范围。

上述基因为如下1）-3）中任意一种的DNA分子：

1）序列表中序列1所示的DNA分子；

2）在严格条件下与1）限定的DNA序列杂交且编码与抗病相关或具有转录激活活性蛋白的DNA分子；

3）与1）限定的DNA序列至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性且编码与抗病相关或具有转录激活活性蛋白的DNA分子。

上述严格条件为：在6×SSC，0.5%SDS的溶液中，在65°C下杂交,然后用2×SSC,0.1%SDS和1×SSC,0.1%SDS各洗膜一次。

含有上述基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌也是本发明保护的范围；其中，重组载体可以为将序列表中的序列1插入pUBI-Adaptor-NOS载体中得到的载体；也可以为将序列表中的序列1插入35S-BD载体的EcoRⅠ与SalⅠ酶切位点间得到的载体。

扩增上述基因全长或其任意片段的引物对也是本发明保护的范围；上述引物对可以是由序列表中的序列3所示的DNA分子和序列表中的序列4所示的DNA分子组成。

上述蛋白、上述基因或上述重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌在抗病或使植物抗病中的应用也是本发明保护的范围。

上述蛋白、上述基因或上述重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌在培育具有抗病性的转基因植物中的应用也是本发明保护的范围。

在上述应用中，所述抗病为抗白粉病；所述白粉病具体为大麦白粉病（Blumeriagraminis f.sp.tritici)；上述大麦白粉病菌具体为大麦白粉菌生理小种K1或A6；

上述植物为双子叶植物或单子叶植物；其中单子叶植物具体为大麦；本发明的实施例中的大麦品种为Pallas（不含任何Mla）、P01（含Mla1）、P03（含Mla6）或P09（含Mla10）。

上述蛋白在作为转录激活因子中的应用也是本发明保护的范围。

上述蛋白作为转录激活因子体现在激活基因表达；本发明的实施例中基因为报告基因LUC。

本发明的实验证明，本发明发现了一种蛋白HvMYB6，将其瞬时表达，发现其可以抗大麦白粉菌生理小种K1或A6引起的病害，进一步研究发现该蛋白还具有转录激活活性，其可以作为转录激活因子。上述研究表明，该蛋白可以为培育具有抗病性的转基因植物的研究奠定基础。

附图说明