[发明专利]与肝病进程相关的检测试剂盒及其应用

权利要求书

1.保藏号为CGMCC No.5269的单克隆抗体杂交瘤细胞株AP0105在制备肝病进程相关的检测试剂或试剂盒中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述杂交瘤细胞株AP0105在制备肝纤维化相关的检测试剂或试剂盒中的应用。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述试剂盒为酶联免疫吸附法检测试剂盒。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述试剂盒含有辣根过氧化物酶标的保藏号为CGMCC No.5269的单克隆抗体杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体。

5.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，所述试剂盒还含有包被液、封闭液、显色液、终止液、质控品、校准品和固相反应板中的一种或几种。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述包被液为碳酸盐包被液、封闭液为5%脱脂奶粉、显色液为TMB显色液、终止液为2M硫酸、校准品为系列浓度的Pep5稀释液、固相反应板为96孔聚丙乙烯微孔板。

7.根据权利要求1-6任一项所述的应用，其特征在于，所述应用中的检测包括如下步骤：

1）包被：取5-30μL临床血清，加入70μL-95μL包被液，置于96孔板中，4℃放置过夜或37℃放置2小时；同时加入100μL包被液作为阴性对照；

2）清洗：弃包被液，用0.01M、pH7.4 PBST缓冲液200-300μL清洗5-7次，拍干；

3）封闭：加入200-300μL 5%的脱脂奶粉，37℃静置封闭2小时；

4）清洗：弃封闭液，用0.01M、pH7.4 PBST缓冲液200-300μL清洗5-7次，拍干；

5）酶结合物：加入80-120μL HRP标记抗体，37℃静置1小时；

6）清洗：弃抗体溶液，用0.01M、pH7.4 PBST缓冲液200-300μL清洗5-7次，拍干；

7）显色：加入80-120μL显色液，37℃避光孵育15min显色；

8）终止：加入30-70μL 2M硫酸，终止反应；

9）读数：用酶联检测仪测定波长450nm的光吸收值；

10）判别：以检测OD值与阴性OD值之比大于2.1为阳性。