[发明专利]拟康氏木霉胞外多糖作为治疗胃癌药物的应用

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，属于拟康氏木霉胞外多糖作为治疗胃癌药物的应用。

背景技术

肿瘤是一种常见病、多发病，其中恶性肿瘤是当前危害人类健康最严重的一类疾病。2008年世界卫生组织统计数据显示，全世界有大约1270万的人被诊断患有肿瘤，近760万的人死于肿瘤，据报道估计，在2030年将有超过2100万的人患有肿瘤，1300万的人将因肿瘤死亡。具数据调查显示全世界因肿瘤死亡的病例占所有死亡病例约为13%。我国最为严重和危害性较大的肿瘤有胃癌、肺癌、鼻咽癌、食管癌、大肠癌、肝癌、乳腺癌、宫颈癌、白血病及淋巴瘤等，每年约有180万人因肿瘤去世。

胃癌早期诊断困难，多数患者确诊时已达晚期，因此以化疗为主的综合治疗成为晚期胃癌的主要治疗手段。在全世界范围，胃癌的死亡率占各类肿瘤死亡率的第二位，约为23.2%。在我国，胃癌占恶性肿瘤发病率和死亡率的首位。

手术、放疗、化疗是治疗肿瘤的三大传统方法，化学治疗是应用于恶性肿瘤全身治疗的主要方法之一，但大部分抗肿瘤化学药物在杀死肿瘤细胞的同时，也严重损伤了正常细胞，因此寻找抗肿瘤活性显著并且对人体毒副作用小的抗肿瘤药物具有重要意义。

多糖(polysaccharide)是由10个以上的单糖通过糖苷键连接形成的含醛基或酮基的多羟基聚合物及其衍生物。多糖具有广泛的生物学功能，不仅可以作为体内的供能物质及细胞的基本组分，还参与细胞识别、机体免疫功能调节、细胞间物质运输、细胞的转化、细胞凋亡等过程。

菌种保藏号为CGMCC No.1443的拟康氏木霉（Trichoderma pseudokoningii）真菌是从玉米秸秆中分离获得的，具有很强的生长优势，液体发酵培养过程中分泌大量的胞外多糖。中国专利文献CN101220101A（申请号为200810014047.8）公开了一种拟康氏木霉胞外多糖，该多糖的特征在于：（1）通过高效凝胶过滤层析检测，其具有单一对称峰，分子量为18325；（2）通过改良的硫酸-苯酚法和间苯基苯酚法检测，其中性多糖含量为65.2%，糖醛酸含量为32.6%；（3）通过糖醇乙酸酯的GC分析，其单糖组成为鼠李糖、葡萄糖和半乳糖，摩尔比为RHA：GLC：GAL=5.6：2.7：1.0。该多糖完全还原后，鼠李糖、葡萄糖和半乳糖的摩尔比为RHA：GLC：GAL=14.5：9.3：1.0，并且其含有摩尔含量为26.6%的葡萄糖醛酸。这种拟康氏木霉胞外多糖的制备方法包括粗多糖的制备和多糖的纯化。

目前，拟康氏木霉胞外多糖的功能性研究已成为拟康氏木霉菌研究的热点，但拟康氏木霉胞外多糖对人类胃癌细胞生长影响的研究还未见报道。

发明内容

本发明的发明内容为拟康氏木霉胞外多糖作为治疗胃癌药物的应用。

所述的拟康氏木霉为CGMCC No.1443的拟康氏木霉（Trichoderma pseudokoningii）。

所述的拟康氏木霉胞外多糖为CN101220101A所制备的多糖。

所述的拟康氏木霉胞外多糖抑制人胃癌细胞生长的机制是通过线粒体途径诱导癌细胞发生凋亡：拟康氏木霉胞外多糖作用于人胃癌细胞后，癌细胞的线粒体膜电位下降，细胞素色C释放，并于凋亡相关因子结合，使癌细胞发生凋亡；同时癌细胞内活性氧 ROS浓度增加，过量的ROS加剧线粒体膜电位的下降和细胞色素C的释放。

本发明与现有技术相比，所述的拟康氏木霉胞外多糖可以在体外降低人胃癌细胞BGC-823、MKN-45、MGC-803细胞活力；使BGC-823细胞周期阻滞于S期，提高其胞内活性氧浓度，并且使细胞内的线粒体膜电位下降，引起人胃癌细胞BGC-823细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻，诱导BGC-823细胞核聚缩、碎裂产生凋亡小体，发生凋亡从而达到杀灭肿瘤细胞，抑制肿瘤生长的目的；拟康氏木霉胞外多糖在体内能够抑制BGC-823荷瘤小鼠、MKN-45荷瘤小鼠、MGC-803荷瘤小鼠肿瘤生长，明显减轻瘤重，具有抗肿瘤作用。

附图说明

图1 不同浓度拟康氏木霉胞外多糖（EPS）体外给药对人胃癌细胞BGC-823体外增殖活性的抑制率；

其中：*表示t检验后，与对照组相比呈显著性差异（P<0.05）

**表示t检验后，与对照组相比呈极显著性差异（P<0.01）

图2 不同浓度拟康氏木霉胞外多糖体外给药对人胃癌细胞MKN-45体外增殖活性的抑制率。

其中：*表示t检验后，与对照组相比呈显著性差异（P<0.05）