[发明专利]一种抗HCV NS3/4A蛋白的人源性单链抗体基因

说明书

技术领域

本发明涉及一种基因，尤其是涉及一种抗HCV NS3/4A蛋白的人源性单链抗体基因及其重组载体和表达产物，属于医药技术领域。 

背景技术

自1989年Choo等（Choo,Q L,Kuo,G,Weiner,A J,Overby,L R,Bradley，M.Isolation of a cDNA clone derived from a blood-borne non-A,non-B viral hepatitis genome.Science,1989,244:359.）确认丙型肝炎病毒（HCV）是非甲非型乙肝炎的主要病原因子以来，抗病毒一直是HCV研究的一个重要领域。迄今仅有的治疗方案是长效干扰素与利巴韦林联合使用，但它在各亚型中总的疗效低于50％。而且这种疗法副作用大，成本高。因此，寻找特异有效的治疗药物和改进现有的治疗方法是抗HCV研究的重要方向。NS3/4A蛋白酶是NS3N末端的180aa和共作用因子NS4A蛋白组成的异源二聚体。它具有胰靡蛋白样丝氨酸蛋白酶活性，在多聚蛋白前体加工成熟中起着重要作用（Bartenschlager R,Ahlborn-Laake L,Mous J,et al.Kinetic and structural analyses of hepatitis C virus polyprotein processing.Journal of virology,1994,68(8):5045-55）。多项研究表明NS3/4A丝氨酸蛋白酶通过调控干扰素调控因子-3（IRF-3）的表达水平，从而破坏细胞内免疫通路，这提示该酶抑制剂有双重作用，即阻断病毒加工成熟和恢复细胞内免疫防御反应（Gale M Jr,Foy EM.Evasion of intracellular host defence by hepatitis C virus.Nature,2005,436(7053):939-45）。以NS3/4A丝氨酸蛋白酶为靶点的抑制剂联合治疗方案在临床抗病毒治疗中亦取得较好的治疗效果，然而编码这些蛋白的病毒基因变异很快，长期用药后变异病毒株很容易对治疗药物产生耐药性，将会限制这些药物的广泛应用（Reesink H.W.,Zeuzem S.,Weegink C.J.,et al.,Rapid decline ofviral RNA in hepatitis C patients treated with VX-950:a phase Ib,placebo-controlled,randomized study.Gastroenterology,2006.131(4):p.997）。因此需要对新的抗HCV治疗策略进行更广泛的探索。鉴于抗原抗体之间的共价结合具有特异、稳定等特点，如用单链抗体（ScFv）拮抗NS3/4A丝氨酸蛋白酶活性，可能会为抗HCV感染带来新的途径。