[发明专利]登革病毒2型NS3蛋白的表位多肽及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及医药领域，特别涉及登革病毒2型NS3蛋白的表位多肽，还涉及该表位多肽的衍生物和应用。

背景技术

登革病毒（dengue virus，DV）是引起人类登革热（classical dengue fever，DF）、登革出血热（dengue hemorrhagic fever，DHF）和登革休克综合征（dengue shock syndrome，DSS）的病原体。近年来，随着人口流动的增加及全球气侯变暖，每年热带和亚热带地区约有 1亿人受到该病毒的感染，其中DHF/DSS 患者约为50万人，病死率高达5%，如未得到及时治疗，病死率可上升至50%。近年来，在流行地区，DHF/DSS的发病率呈明显增加趋势，已成为严重的公共卫生问题。但迄今为止，DF、DHF和DSS的发病机制仍不十分清楚，也缺乏安全有效的预防疫苗和治疗药物。因此，DF、DHF和DSS已成为当今世界严重的公共卫生问题，对其病原体、发病机理及防治策略的相关研究具有重要意义。

DV是黄病毒属的单链正股RNA病毒，基因组约为10kb、含有一个ORF，编码3个结构蛋白（C, prM 和E）和7个非结构蛋白（NS1-NS2a/2b-NS3-NS4a/4b-NS5）。DV有四个血清型（DV1-DV4），以蚊虫为传播媒介，其中主要流行的是DV2。目前，DV致病机理和人体免疫防御机制不明，缺乏有效的治疗手段，临床上仍以治疗为主。由于人体抵抗不同型DV感染的能力弱，发病地区的人群反复感染DV是比较常见的，因而潜在的DHF/DSS发生的可能性很大，导致DV的危害性呈上升趋势。DV致病机理和人体免疫防御机制不明使得DV的疫苗研究仍处在实验阶段。DV疫苗研究的重点集中在研制四价疫苗，希望获得能同时针对四型DV的疫苗，从而在根本上防治DV感染和DHF/DSS的出现。减毒四价活疫苗曾一度被认为是最具前景的候选疫苗。但由于是减毒或灭活病原体，存在一定的毒副作用。基因工程疫苗研究虽然取得了较大进步，获得了各种重组的DV蛋白。但无论是大肠杆菌还是真核体系的酵母菌、杆状病毒、哺乳动物细胞等表达方式均有不足，且重组蛋白纯化复杂，避免蛋白结构和功能改变困难。迄今为止，仍然没有获得既安全又有效的疫苗。20 世纪80 年代初，Lerner等提出发展合成多肽疫苗，并预测合成多肽疫苗将是人类预防疾病的终极武器。合成肽疫苗 (synthetic peptide vaccine) 就是用化学合成抗原表位氨基酸序列法制备而成的具有保护性作用的类似天然抗原决定簇的多肽疫苗。多肽具有免疫背景明确、稳定、纯度高、易于获得、批间差异极小、无毒副作用等优点，还有一个极大的优势就在于可对任意氨基酸顺序组合进行合成，可以极方便地将多种病原的表位、同类病原不同亚型的表位组合在一起，从而获得针对多种疾病的超级疫苗。这种疫苗不含核酸，是最为理想的安全新型疫苗，也是目前研制预防和控制感染性疾病和恶性肿瘤的新型疫苗的主要方向之一。

对于合成肽疫苗的设计，最重要的一步是找到特异的抗原表位。登革病毒的非结构蛋白3(NS3)是一个多功能蛋白，具有多种酶活性，涉及到病毒多聚蛋白的加工和RNA的复制及5’加帽。该蛋白具有很好的免疫原性，并存在特异的CD4⁺和CD8⁺ T 细胞识别表位。可诱导机体产生特异性的体液免疫和细胞免疫反应。

因此，急需一种登革病毒2型NS3蛋白的表位肽，特异性高、免疫原性好。

 发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一个登革病毒2型NS3蛋白的表位多肽；本发明的目的之二在于提供一个含登革病毒2型NS3蛋白的表位多肽的衍生物，本发明的目的之三在于提供衍生物在制备预防或治疗登革病毒2型感染的药物中的应用。本发明的目的之四在于提供衍生物在制备诊断或检测登革病毒2型感染的试剂中的应用。

为实现上述发明目的，技术方案为：

1.登革病毒2型NS3蛋白的表位多肽，所述表位多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.含权利要求1所述表位多肽的衍生物，所述衍生物为所述表位多肽与载体蛋白偶联的交联体。

优选的，所述载体蛋白为牛血清白蛋白。

3.所述的衍生物在制备预防或治疗登革病毒2型感染的疫苗中的应用。

4.所述的衍生物在制备诊断或检测登革病毒2型感染的试剂中的应用。