[发明专利]维生素C对效应记忆性T细胞的数量在体外扩增上的应用无效
| 申请号： | 201210502579.2 | 申请日： | 2012-11-30 |
| 公开（公告）号： | CN102925411A | 公开（公告）日： | 2013-02-13 |
| 发明（设计）人： | 张辉;张译文;罗海华;刘超 | 申请（专利权）人： | 中山大学 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 广州致信伟盛知识产权代理有限公司 44253 | 代理人： | 李东来 |
| 地址： | 510275 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 维生素 效应 记忆 细胞 数量 体外 扩增 应用 | ||
1.维生素C对效应记忆性T细胞的数量在体外扩增上的应用。
2.根据权利要求1所述的维生素C对效应记忆性T细胞的数量在体外扩增上的应用，其特征在于，所述效应记忆性T细胞为CD4+T细胞。
3.根据权利要求1所述的维生素C对效应记忆性T细胞的数量在体外扩增上的应用，其特征在于，所述维生素C的浓度为50μg/ml ~125μg/ml。
4.根据权利要求3所述的维生素C对效应记忆性T细胞的数量在体外扩增上的应用，其特征在于，所述维生素C的浓度为100μg/ml。
5.根据权利要求1所述的维生素C对效应记忆性T细胞的数量在体外扩增上的应用，其特征在于，所述效应记忆性T细胞的提取方法是先将外周成分血与含2% BSA和0.5% EDTA的PBS按体积比1:4混合均匀；然后将稀释后的血液缓慢加入淋巴细胞分离液的上方，二者的体积比为1:1；离心1450rmp 45 min；小心吸取单核细胞，置入另一离心管中，加入5倍体积的含0.5% BSA和2% EDTA 的PBS稀释，混合均匀后，离心300×g 15 min；重复上一步骤一次；孵育CD4+T细胞阴选一抗，15 min；用10倍体积的含0.5% BSA和2% EDTA 的PBS稀释，混合均匀后，离心300×g 12 min；孵育带有磁珠的二抗，30 min；过柱进行细胞分选，得到CD4+ T细胞。
6.根据权利要求1所述的维生素C对效应记忆性T细胞的数量在体外扩增上的应用，其特征在于，所述效应记忆性T细胞的培养方法是在5% CO2、饱和湿度及37oC条件下将5×105个/孔的CD4+T细胞置于1 mL含10%胎牛血清的RPMI1640中培养。
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