[发明专利]高含油量小环藻突变株及其筛选和培养方法

权利要求书

1.一种高含油量小环藻突变株，其特征在于，它保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，保藏地址在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期为2012年9月5日，保藏编号为CGMCC No.6448。

2.一种高含油量小环藻突变株的筛选及培养方法，其特征在于，步骤如下：

a.取对数生长期的小环藻藻液，稀释至10⁴个细胞/mL，在音频70KHz条件下，处理300~450s进行诱变；

b.将诱变后的藻液涂于D1固体培养基上，培养15天后挑取成活的藻落，分别接种于新鲜的D1固体培养基，在24℃、光暗培养时间比14：10、光照培养时光照强度2500lex的条件下继续培养15天；

c.将各藻落进行编号，并依次取少量藻体分别加入100μL的D1液体培养液中；

d.向步骤c得到的各藻液中分别加入0.l mg/mL尼罗红染料0.1μL，静置10min后，利用荧光显微镜观察各藻液中的油脂含量；

e.取油脂含量高的藻株培养在D1液体培养基中大量繁殖，在细胞浓度达到5×10⁶个/mL时，置换新鲜的D1液体培养基，培养5天，然后用油脂富集培养基继续培养60小时，所述的油脂富集培养基为D1液体培养基的配方中去掉氮元素和/或硅元素得到的培养基。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤a中所述的诱变时间为350s。

4.如权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述的油脂富集培养基为D1液体培养基的配方中去掉NaNO₃和Co(NO₃)₂·6H₂O得到的培养基。

5.如权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述的油脂富集培养基为D1液体培养基的配方中去掉NaSiO₃·9H₂O得到的培养基。

6.如权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述的油脂富集培养基为D1液体培养基的配方中去掉NaNO₃、Co(NO₃)₂·6H₂O和NaSiO₃·9H₂O得到的培养基。