[发明专利]一种提高胶体金免疫层析试纸条检测灵敏度的方法

说明书

技术领域

 本发明属于胶体金检测领域，具体涉及一种提高胶体金免疫层析试纸条检测灵敏度的方法。

背景技术

食品是人类赖以生存和发展的物质基础，食品安全则直接关系到人类健康。然而，近年来恶性食品安全事故接连不断出现，如病原微生物超标、三聚氰胺牛奶、瘦肉精猪肉、黄曲霉毒素奶等。针对食品中微生物、真菌毒素、药物残留、重金属等污染问题，目前，免疫层析试纸条技术已广泛应用到食品，农产品等领域。其中最为常见的免疫层析试纸条为胶体金免疫层析试纸条。胶体金免疫层析试纸条适用于现场快速检测，最初主要用于蛋白质、微生物及多种化合物的定性检测，仅需肉眼即可完成判断。随着食品安全学科领域发展，各国对于食品中的污染物都有明确的限量要求，单纯的胶体金免疫层析试纸条定性检测对于很多种污染物检测已经难以满足消费者对污染物的定量要求。胶体金免疫层析试纸条读条仪的出现使得胶体金试纸条由定性检测逐渐转变到定量检测水平。

然而，胶体金免疫层析试纸条读条仪虽然能提高检测灵敏度，但是检测灵敏度有限，且这种结合光学的检测技术容易受试纸条本身背景的干扰。为进一步提高读条仪的读数灵敏度，研究者分别从信号增强、数据处理等方面进行优化。现有技术中，主要采用增敏试剂对检测试纸条进行增敏处理，来提高检测的灵敏度，但氯金酸和抗坏血酸作为常用的增敏试剂，成本较高，不适于广泛应用。因此在这些研究基础上，研究一种能降低试纸条自身背景值的处理方法，对于进一步改善胶体金免疫层析试纸条的读数灵敏度具有重要意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对上述现有技术存在的不足而提供一种提高胶体金免疫层析试纸条检测灵敏度的方法。其可提高胶体金免疫层析试纸条的检测灵敏度，增大检测线性范围，操作简单方便。

本发明为解决上述提出的问题所采用的技术方案为：

一种提高胶体金免疫层析试纸条检测灵敏度的方法，具体步骤如下：

（1）透明化试剂的配制：选取苯甲醇与甲醇作为配方组分，将两者以体积为9:1～10:1充分混匀，制得透明化试剂，避光密封保存；

（2）试纸条处理：取胶体金免疫层析试纸条对待测样品进行检测，检测完成后在胶体金免疫层析试纸条的检测区滴加步骤（1）配制得到的透明化试剂，放置待试纸条检测区由白色变成透明后，读条仪即可进行读数。

按上述方案，所述步骤（2）中就是透明化试剂的使用量为50~100μL。

按上述方案，所述步骤（2）的放置时间为3~5min。

按上述方案，所述的胶体金免疫层析试纸条为真菌毒素胶体金免疫层析试纸条或病毒胶体金免疫层析试纸条。

本发明在检测前通过对胶体金试纸条进行预处理，可使胶体金试纸条上检测区的硝酸纤维素膜由白色非透明的易碎结构转变成透明且具备一定韧性的薄膜结构（见图1），而降低光反射作用造成的背景干扰；同时还可防止因胶体金自身氧化而使显色区域逐渐变色，而通过对胶体金试纸条显色区域的颜色固定，达到避免因胶体金氧化而对试纸条的读数检测造成不良影响的作用，预处理完毕后再进行读条仪读数，可达到降低背景值影响，提高胶体金免疫层析试纸条检测灵敏度的目的。

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

（l）提高检测灵敏度，增大检测线性范围；采用本发明方法对胶体金免疫层析试纸条进行处理后可使读条仪进行检测时的最小有效读数减小，从而可提高胶体金免疫层析试纸条的检测灵敏度，增大其检测线性范围；

（2）操作简单方便，无需专业人员； 

（3）处理时间短，检测完成后3~5分钟即可完成。

附图说明

图1为本发明实施例1处理前后的黄曲霉毒素总量胶体金免疫层析试纸条的纵切面剖视图，图中T检测线，C质控线。

具体实施方式

为了更好地理解本发明，下面结合实例进一步阐明本发明的内容，但本发明不仅仅局限于下面的实施例。

实施例1：

实验组： 

（1）透明化试剂的配制：选取苯甲醇与甲醇作为配方组分，按照1mL甲醇加入110μL苯甲醇比例充分混匀，避光密封保存；