[发明专利]一种基于大肠杆菌原核表达系统的制备死亡素的方法无效
申请号: | 201210507640.2 | 申请日: | 2012-11-30 |
公开(公告)号: | CN102943077A | 公开(公告)日: | 2013-02-27 |
发明(设计)人: | 陈利淼;王涛;刘云龙;任飞;吕正兵 | 申请(专利权)人: | 杭州蚕宝生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/70;C12N1/21;C12P21/02;C12R1/19 |
代理公司: | 杭州赛科专利代理事务所 33230 | 代理人: | 曹绍文 |
地址: | 310009 浙江省杭*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 大肠杆菌 表达 系统 制备 死亡 方法 | ||
1.一种重组基因,其特征在于,包括依次相连的融合伴侣基因序列、甲硫氨酸密码子、死亡素重复序列和终止密码子;死亡素重复序列由1~15个死亡素基因串联而成,死亡素基因序列由死亡素的氨基酸序列逆推而来。
2.如权利要求1所述的重组基因,其特征在于,融合伴侣基因序列前还设有导肽序列。
3.如权利要求1所述的重组基因,其特征在于,所述融合伴侣基因序列为多角体蛋白基因从起始密码子开始的90个碱基序列。
4.含权利要求1~3任一项所述重组基因的原核表达质粒。
5.含权利要求4所述重组基因的原核表达质粒的大肠杆菌。
6.一种制备死亡素的方法,包括如下步骤:
(1)诱导如权利要求5所述的大肠杆菌内表达重组蛋白;
(2)分离纯化重组蛋白;
(3)用溴化氰处理,将重组蛋白切割成多个独立完整的死亡素;
(4)分离纯化死亡素。
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