[发明专利]人脐带间充质干细胞的提取和培养方法

权利要求书

1.一种人脐带间充质干细胞的提取和培养方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：

步骤1：取健康胎儿脐带切去动脉和静脉，剪碎；

步骤2：用I型胶原酶消化脐带；

步骤3：磷酸盐缓冲液清洗组织块；

步骤4：组织块移入培养瓶中，加入培养基；

步骤5：培养瓶放入培养箱中持续传代培养。

2.根据权利要求1所述的人脐带间充质干细胞的提取和培养方法，其特征在于：步骤1中，脐带去除两天脐动脉和一条脐静脉，并剪碎至0.5mm³-2mm³。

3.根据权利要求1所述的人脐带间充质干细胞的提取和培养方法，其特征在于：步骤2中，脐带使用I型胶原酶消化，I型胶原酶的质量体积比为0.2%-1%，每克脐带组织使用0.5-2毫升I型胶原酶消化，消化时间为1-3小时。

4.根据权利要求1所述的人脐带间充质干细胞的提取和培养方法，其特征在于：步骤4中使用的培养基成分包括胎牛血清，人成纤维生长因子，人上皮细胞生长因子，细胞转录因子，胆固醇。

5.根据权利要求4所述的人脐带间充质干细胞的提取和培养方法，其特征在于：培养基的成分配比为胎牛血清5%-10%，人成纤维生长因子5-10ng/ml，人上皮细胞生长因子5-10ng/ml，细胞转录因子1-5ng/ml，胆固醇10-20ng/ml。

6.根据权利要求1的人脐带间充质干细胞的提取和培养方法，其特征在于：培养基使用低糖DMEM培养基，并且加入了质量体积比0.5%-2%的青霉素和链霉素。