[发明专利]一种薏仁多糖的制备方法与应用

权利要求书

1.一种薏仁多糖的制备方法，其特征在于：步骤如下：

⑴薏仁粗多糖的提取：

将薏仁粉碎、过筛后，分别用乙酸乙酯和石油醚脱脂后，按料液比g：g为1:20-30加入蒸馏水中并调节pH到5.2，85-95℃水浴提取3-5h；提取后趁热，取上清液冷却，酶解去淀粉，然后在3,000r/min下离心9-11min，得上清液；上清液浓缩后，加入2-4倍浓缩液体积的95%冰乙醇沉淀过夜，得沉淀，沉淀经真空冷冻干燥，得薏仁粗多糖；

⑵薏仁粗多糖的纯化：将步骤⑴中制得的薏仁粗多糖加水溶解，得薏仁粗多糖溶液，经过脱蛋白、脱色、透析和离子交换柱层析得薏仁纯化多糖，再经过真空冷冻干燥得白色粉末，即为薏仁多糖。

2.根据权利要求1所述的薏仁多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤⑴中酶解去淀粉的具体步骤如下：

按酶：上清液的比例为20IU/g加淀粉酶到上清液中，水浴温度60℃、pH7.0去淀粉直到碘检不变色；然后按酶：上清液的比例为18IU/g加糖化酶，在水浴温度50℃~60℃，pH6.5条件下处理0.5-1.5h；100℃水浴条件下灭酶8-11min。

3.根据权利要求1所述的薏仁多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤⑵中脱蛋白的具体步骤如下：

向薏仁粗多糖溶液中加入1/3粗多糖溶液体积的Sevage试剂，剧烈震荡30min，3,000r/min离心15min，除去变形蛋白沉淀，水相重复上述操作至没有变性蛋白沉淀产生。

4.根据权利要求1所述的薏仁多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤⑵中脱色的具体步骤如下：

使用浓氨水调节脱蛋白后的薏仁粗多糖溶液pH至pH8.0，再滴加质量百分数30%H₂O₂至浅黄色，于50℃水浴保温2h。

5.根据权利要求1所述的薏仁多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤⑵中的透析的条件为：用截留相对分子质量为8,000-14,000的透析袋流水透析2d。

6.根据权利要求1所述的薏仁多糖的制备方法，其特征在于：所述步骤⑵中的离子交换柱材料为DEAE-52纤维素柱材料。

7.一种如权利要求1至6任一项所述的薏仁多糖的制备方法所制备得到的薏仁多糖在制备抗肿瘤药物中的应用。

8.一种如权利要求1至6任一项所述的薏仁多糖的制备方法所制备得到的薏仁多糖在制备诱导细胞凋亡药物中的应用。

9.根据权利要求8所述的薏仁多糖在制备诱导细胞凋亡药物中的应用，其特征在于：所述薏仁多糖的作用浓度为300μg/mL。