[发明专利]包含氟苯尼考耐药基因蛋白的卵黄抗体及制备与应用

说明书

技术领域

本发明属于生物制品和畜禽疾病防控技术领域。具体涉及一种抗氟苯尼考耐药基因蛋白（FloR）的卵黄抗体、其制备方法及应用。

背景技术

氟苯尼考是一种广谱、高效，动物专用抗菌药。中国也在1999年批准该药上市，已广泛用于治疗牛、猪、鸡、鸭及鱼类的细菌性疾病。但随着用药的增多，临床上细菌对此药的耐药性问题也日渐突出，耐药率逐年升高。近年来，由于鸭场广泛使用该药，使得鸭疫里默氏杆菌和致病性大肠杆菌对其耐药的问题非常严重。

细菌对氟苯尼考耐药主要由floR基因介导，携带floR基因的菌株对氟苯尼考高度耐药（Singer R,Patterson S,Meier A,Gibson J,Lee H,Maddox C.Relationship between phenotypic and genotypic florfenicol resistance in Escherichia coli.Antimicrobial Agents Chemotherapy,2004,48:4047–4049），且氟苯尼考耐药菌株中基本上可检测到floR基因。自Kim等首次从鱼巴氏杆菌质粒中发现氟苯尼考耐药基因以来（Kim E,Aoki T.Sequence analysis of the florfenicol resistance gene encoded in the transferable R-plasmid of a fish pathogen,Pasteurella piscicida.Microbiology Immunology,1996,40:665-669），相继从沙门氏菌、大肠杆菌、波氏杆菌、鸭疫里默氏杆菌等病原菌中克隆到floR基因，且这些菌株携带的floR基因高度同源。

floR基因主要存在于细菌质粒中，部分存在于染色体上。floR基因转录、翻译的蛋白FloR蛋白位于菌体细胞膜中，含有12个疏水跨膜区，属于主要易化子（MF）超家族。FloR蛋白为氯霉素类（氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考）药物特异的转运泵，通过质子动力介导药物从菌体内外排（Braibant M,Chevalier J,Chaslus-Dancla E,Pagès J,Cloeckaert A.Structural and functional study of the Phenicol-specific efflux pump FloR belonging to the major facilitator superfamily.Antimicrobial Agents Chemotherapy,2005,49:2965–2971）。Du等将floR基因的开放读码框和启动子克隆到pGEM-T载体中，通过质粒转化构建的floR基因重组大肠杆菌能显著抑制氟苯尼考在胞内聚集（Du X,Xia C,Shen J,WuB,Shen Z.Characterization of florfenicol resistance among calf pathogenic Escherichia coli.FEMS Microbiology Letters,2004,236:183–189）。