[发明专利]萝卜霜霉病抗性基因紧密连锁的分子标记

权利要求书

1.一种萝卜霜霉病抗性基因紧密连锁的分子标记Em9/ga24₃₇₀，其特征在于所述的分子标记Em9/ga24₃₇₀由序列如SEQ ID NO.1所示的正向引物Em9和序列如SEQ ID NO.2所示的反向引物ga24通过PCR扩增具有霜霉病抗性的萝卜基因组DNA得到，所述的具有霜霉病抗性的萝卜选自抗病亲本‘NAU-dhp08’。

2.权利要求1所述的萝卜霜霉病抗性基因紧密连锁的分子标记Em9/ga24₃₇₀的引物组合Em9/ga24，其特征在于正向引物Em9序列如SEQ ID NO.1所示，反向引物ga24序列如SEQID NO.2所示。

3.权利要求1所述的萝卜霜霉病抗性基因紧密连锁的分子标记Em9/ga24₃₇₀的检测方法，其特征在于包含如下步骤：

（1）以被检测的萝卜基因组DNA为模板，以权利要求2所述的引物组合Em9/ga24进行PCR扩增；

（2）能够扩增出370bp特异条带的，说明存在萝卜霜霉病抗性基因紧密连锁的分子标记Em9/ga24₃₇₀；未扩增出370bp特异条带的，说明不存在萝卜霜霉病抗性基因紧密连锁的分子标记Em9/ga24₃₇₀。

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于所述的PCR扩增，其反应体系：1×PCR buffer，3.0mM Mg²⁺，0.20mM dNTPs，0.5U Taq DNA聚合酶，每个引物0.30μM和模板DNA10ng，总体系10μL；反应程序为：94℃3min；94℃60s,35℃60s,72℃90s，5个循环；94℃60s，50℃60s，72℃90s，33个循环；72℃延伸7min；扩增产物检测在8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶上进行，电极缓冲液为1×TBE，恒定电压150伏，凝胶采用硝酸银染色。

5.权利要求1所述的分子标记Em9/ga24₃₇₀在萝卜霜霉病种质材料抗性鉴定或抗性基因检测中的应用。

6.一种萝卜霜霉病抗性鉴定的方法，其特征在于包括使用权利要求1所述的分子标记Em9/ga24₃₇₀的步骤。

7.权利要求1所述的分子标记Em9/ga24₃₇₀在萝卜霜霉病抗性标记辅助育种中的应用。

8.一种萝卜霜霉病抗性标记辅助育种方法，包括检测权利要求1所述的分子标记的步骤。