[发明专利]淫益增蛋超微粉成分补骨脂素及异补骨脂素的鉴别方法

说明书

技术领域

本发明涉及两种超微粉成分的鉴别，特别涉及一种能鉴别淫益增蛋超微粉中补骨脂素及异补骨脂素的试验方法。 

背景技术

目前在国家各类中兽药制剂质量标准中，其成分药的薄层鉴别平均约为处方中药材总量的30%，无法全方位监控制剂质量。尤其是超微粉制剂，药材的显微特征已不复存在，显微鉴别对其束手无策，用薄层鉴别定性控制制剂中特征性标示成分，可控制制剂质量，使得药物制剂符合质量标准达到其治疗效果。 

对药材补骨脂的薄层鉴别方法，中国兽药典2010年版对其有详细描述，但对含补骨脂的复方制剂使用此方法鉴别补骨脂成分补骨脂素与异补骨脂素时，干扰较大，斑点不清晰，难以达到中国兽药典的要求。现公开的薄层鉴别方法测定含补骨脂的复方中兽药中补骨脂素与异补骨脂素时，斑点清晰，结果易于观察。 

发明内容

本发明的目的在于公开一种能鉴别淫益增蛋超微粉中补骨脂素及异补骨脂素的试验方法，通过多次重复试验证实该方法对于淫益增蛋超微粉中补骨脂素及异补骨脂素的鉴别操作简单、结果易于观察。 

本发明一种能鉴别淫益增蛋超微粉中补骨脂素及异补骨脂素的试验方法，该方法包括以下步骤： 

第一步：取淫益增蛋超微粉2.7g，加乙酸乙酯20ml，超声处理15min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。 

第二步：取补骨脂素、异补骨脂素对照品，加甲醇制成每ml各含 0.2mg的混合溶液。 

第三步：吸取供试品及对照品各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（4:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%氢氧化钾甲醇溶液， 

第四步：置365nm紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上显相同的两个荧光斑点。 

本发明方法的建立过程如下： 

仪器与试剂 

仪器：AUW220D1/1 万电子天平；JCX-400GZ超声波清洗器。薄层自动点样仪，全自动薄层色谱成像系统。 

试剂：补骨脂素与异补骨脂素对照品；薄层层析硅胶G板；乙酸乙酯、甲醇、氢氧化钾均为市售分析纯。 

薄层鉴别方法的建立 

对照品溶液制备：按2010年版中国兽药典要求取补骨脂素、异补骨脂素对照品，加甲醇制成每ml各含 0.2mg的溶液，作为对照品溶液。 

样品溶液的制备：取本品粉末约2.7g，加乙酸乙酯20ml，超声处理15min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液。 

 阴性样品的制备：按照淫益增蛋超微粉的处方制备不含补骨脂的阴性对照样品，再按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。 

薄层色谱试验：吸取供试品及对照品各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，分别以正己烷-乙酸乙酯（4:1）和环己烷-乙酸乙酯（4:1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%氢氧化钾甲醇溶液，置紫外灯（365nm）下检视， 

结果 

供试品色谱中， 在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，可检出 补骨脂素、异补骨脂素；使用环己烷-乙酸乙酯4:1与正己烷-乙酸乙酯4:1作为展开剂相比，结果显示使用环己烷-乙酸乙酯4:1作为展开剂，供试品色谱斑点更清晰，也无拖尾，背景无干扰，经无补骨脂阴性样品对照，色谱无干扰。重复 3 次，结果相同。 

结论 

本发明优于已公开的技术，方法简单，又能达到中国兽药典的要求。尤其适用于含补骨脂的复方淫益增蛋超微粉。 

附图说明

图1是药材补骨脂的薄层色谱图， A是采用中国兽药典2010年版所述方法做出的补骨脂薄层色谱图；B 是采用本发明所述方法做出的补骨脂薄层色谱图，斑点从左到右第一个为补骨脂素及异补骨脂素对照品，第二至第四为补骨脂样品。 

图2是采用本发明所述方法做出的淫益增蛋超微粉的薄层色谱图， 斑点从左到右第一个为空白对照，第二个为无补骨脂淫益增蛋超微粉阴性对照样品，第三个为补骨脂素及异补骨脂素对照品，最后两个为淫益增蛋超微粉样品。 

图3是淫益增蛋超微粉的薄层色谱图，A是采用中国兽药典2010年版所述方法做出的淫益增蛋超微粉的薄层色谱图；B 是采用本发明所述方法所做不同批次淫益增蛋超微粉的薄层色谱图，斑点从左到右第一个为补骨脂素及异补骨脂素对照品， 第二至第五为淫益增蛋超微粉样品，最后一个为异补骨脂素对照品。