[发明专利]一种重组人血管内皮抑素显像剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医学领域，具体涉及一种重组人血管内皮抑素制备新型血管生成显像剂及其在肿瘤血管生成显像诊断中的用途。

背景技术

肿瘤血管生成在肿瘤生长和转移过程中起着重要的作用。早在上个世纪70年代，Folkman教授就提出“肿瘤生长和转移有赖于新生血管形成”的理论。根据这一理论所建立的抗肿瘤血管生成治疗——休眠疗法(dormancy therapy)已成为当今肿瘤治疗的热门研究领域之一。一些抗血管生成靶向药物已应用于临床，例如贝伐单抗、恩度等。大量的临床研究证实这些药物联合化疗或放疗给患者带来了更高的治疗有效率。根据药物作用机理，抗血管生成治疗并非直接杀死肿瘤细胞，其治疗并不能使肿瘤迅速缩小，而是抑制其生长和转移。目前用于评价化疗疗效的RECIST标准及WHO标准均是根据传统影像学观测治疗前后肿瘤大小变化来判定疗效。这样的疗效评价标准显然不能及时、准确地评价抗血管生成的治疗。随着越来越多的肿瘤抗血管生成治疗在临床的推广应用，临床上迫切需要一种新的方法来预测及评价抗血管生成治疗。

正电子发射体层显像（Positron Emission Tomography，PET）以正电子放射性核素标记的药物为显像剂，可以显示和测定所标记的显像剂在活体的分布。其可通过标记不同的生物分子显示不同的生理和病理代谢变化，例如葡萄糖、蛋白质、脂肪及核酸在活体的代谢，在疾病的早期诊断、疗效监测、病因学探讨及药物研发等方面起到了重要作用。PET/CT的发明，更是将PET高灵敏度的代谢图像与CT高分辨率的解剖图像相融合，使其在疾病的诊断中具有更高的准确性。利用正电子放射性核素进行肿瘤血管生成通路相关分子的标记，就可以通过PET或PET/CT在活体直接反映肿瘤新生血管状况，使得肿瘤血管生成分子显像成为可能。

磁共振成像(magnetic resonance imaging，MRI)是基于核磁共振原理的成像技术，已广泛应用于多种疾病的诊断。MR显像具有无创、无害性，特别是其对软组织具有极高的分辨率。钆（Gd）络合物作为MR造影剂在上世纪80年代就已应用于临床。目前临床常用的Gd造影剂有：gadopentetate dimeglu-mine(gadoliniumdiethylenetriaminopenta-acetic acid-Gd-DTPA),gadoteridol(Gd-HP-DO3A),gadoterate meglumine(gadolinium tetra-azacy-clododecanetetre-aceticacid-Gd-DOTA)和gadodiamide(Gd-DTPA-bismethylamide)。应用这些Gd造影剂，可以增加肿瘤病灶的检出率。但目前应用于临床的Gd造影剂无肿瘤和器官特异性，利用Gd标记某种抗体或生物分子进行特异性的靶向MR分子显像已成为一个新的研究方向。最近，Tan等报道了利用一种特异性靶向肿瘤基质中的纤维蛋白-纤维链接蛋白复合物的MR分子显像剂，CLT1-G2-(Gd-DOTA)，进行人前列腺癌荷瘤裸鼠MR显像的研究（Pharm Res.2012;29(4):953-60.）。这证明利用Gd络合物标记生物分子进行靶向MR分子显像是科学可行的。

1997年，O’Reilly等从小鼠的血管内皮瘤细胞(EOMA)的培养血清中分离出的不同于血管抑素的血管生成抑制剂，命名为Endostatin（血管内皮抑素）。对Endostatin的氨基酸序列分析显示它是胶原ⅩⅧ的C末端非胶原区的氨基酸片段，分子量为20kD，包含有184个氨基酸。Endostatin作用的直接靶点为新生血管的内皮细胞，对其它细胞及正常静止的内皮细胞没有抑制作用。2005年，重组人血管内皮抑制素（Endostar，恩度）在我国上市，联合化疗药物用于治疗Ⅲ、Ⅳ期非小细胞肺癌，具有靶向明确、无耐药性、毒副作用小、潜在抗肿瘤转移的优势。恩度在原始Endostatin序列N端基础上添加了9个氨基酸，使其性状更稳定，保持了其在体内的活性。张金赫等应用¹³¹I对Endostatin进行标记，结果显示对Endostatin可以成功进行¹³¹I标记，并且产物对内皮细胞的抑制率还高于单纯Endostatin，在体外也具有一定的稳定性。但¹³¹I仅能用于SPECT显像，其显像分辨率较低，限制了其临床应用。