[发明专利]人源抗人血管内皮细胞生长因子抗体及其应用

权利要求书

1.一种人源抗VEGF抗体，其特征在于，其轻链CDR3的氨基酸序列含有如SEQID NO.3~9中的任意一条氨基酸序列。

2.如权利要求1所述的抗体，其特征在于，其轻链CDR1、CDR2分别含有如SEQID NO.1和SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，其重链CDR1、CDR2和CDR3分别含有如SEQ ID NO.10、SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示的氨基酸序列。

3.如权利要求1所述的抗体，其特征在于，其轻链CDR1氨基酸序列为RASQSVSSSYLA，其轻链CDR2氨基酸序列为GASSRAT，其轻链CDR3氨基酸序列为SEQ ID NO.3~9中的任意一条；其重链CDR1氨基酸序列为SYAMS，重链CDR2氨基酸序列为AITGTGGETYYTDSVKG、重链CDR3氨基酸序列为GWSYNGVDP。

4.如权利要求1所述的抗体，其特征在于，其重链可变区和轻链可变区氨基酸序列分别选自以下各组中的一组：SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14所示的氨基酸序列、SEQID NO.13和SEQ ID NO.15所示的氨基酸序列、SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.16所示的氨基酸序列、SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.17所示的氨基酸序列、SEQ ID NO.13和SEQID NO.18所示的氨基酸序列、SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.19所示的氨基酸序列、SEQID NO.13和SEQ ID NO.20所示的氨基酸序列。

5.如权利要求1~4任一所述的抗体，其特征在于，其为单链抗体、Fab、微型抗体、嵌合抗体或全抗体免疫球蛋白IgG1、IgG2、IgG4、IgA、IgE、IgM或IgD。

6.编码权利要求1~5任一项所述抗体的基因。

7.如权利要求6所述的基因，其特征在于，编码重链可变区和轻链可变区的核苷酸序列选自以下各组中的一组：SEQ ID No.21和22所示的核苷酸序列、SEQ ID No.21和SEQ ID No.23所示的核苷酸序列、SEQ ID No.21和SEQ ID No.24所示的核苷酸序列、SEQ ID No.21和SEQ ID No.25所示的核苷酸序列、SEQ ID No.21和SEQ ID No.26所示的核苷酸序列、SEQ ID No.21和SEQ ID No.27所示的核苷酸序列、SEQ ID No.21和SEQ ID No.28所示的核苷酸序列。

8.含有权利要求6或7所述基因的表达载体。

9.含有权利要求8所述表达载体的宿主菌、宿主细胞或表达盒。

10.含有权利要求1~5任一项所述抗体的药物或检测试剂。

11.权利要求1~5任一项所述抗体在制备以VEGF为靶标的疾病治疗药物中的应用。

12.制备权利要求1~5任一项所述抗体的方法，其特征在于，利用噬菌体展示抗体库技术筛选抗VEGF特异性单链抗体，获得抗体轻重链可变区基因，并将其克隆入全抗体表达载体，通过哺乳动物表达系统对其进行全抗体表达，获得其全抗体蛋白。

13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述的抗体轻重链可变区基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.39和SEQ ID NO.40所示。

14.一种免疫毒素，其特征在于，包含连接于细胞毒性剂的权利要求1~5任一所述的抗体。

15.如权利要求14所述的免疫毒素，其特征在于，连接方式为抗体被标记、体外交联或分子偶联。

16.如权利要求14所述的免疫毒素，其特征在于，所述细胞毒性剂包括化学分子、放射性同位素、多肽或毒素对细胞具有杀伤或诱导细胞死亡特性的物质。

17.一种双特异性或多特异性分子，其特征在于，包含权利要求1～5任一项抗体或抗体的抗原结合部位。

18.一种抗体与其他蛋白或/和多肽的融合蛋白，其特征在于，包含权利要求1～5之任一项抗体和功能性蛋白或多肽分子的复合物。

19.如权利要求18所述的融合蛋白，其特征在于，将抗体基因与免疫毒素或细胞因子基因连接构建重组表达载体，通过哺乳动物细胞或其他表达系统获得重组融合蛋白分子。