[发明专利]ABO血型反定型胶体金试剂盒及制备方法

权利要求书

1.ABO血型反定型胶体金试剂盒，其特征在于，包括反应板，红细胞膜抗原金粒子与基础液，反应板上设置3N个反应孔，分为三横排和N纵排，其中第一横排标有字母A，所对应的孔为A反应孔，第二横排标有字母B，所对应的孔为B反应孔，第三横排标有字母O，所对应的孔为O反应孔，或者分为三纵排和N横排，其中第一纵排标有字母A，所对应的孔为A反应孔，第二纵排标有字母B，所对应的孔为B反应孔，第三纵排标有字母O，所对应的孔为O反应孔，其中N=1，2，3，4……，反应孔为圆形结构，孔底光滑呈U型，反应孔上设置密封盖，所述A反应孔含有A红细胞膜抗原金粒子与基础液，所述B反应孔含有B红细胞膜抗原金粒子与基础液，所述O反应孔含有O红细胞膜抗原金粒子与基础液，所述基础液配方如下：

超纯水定容至1L。

2.根据权利要求1所述的ABO血型反定型胶体金试剂盒，其特征在于，所述基础液配方如下：

超纯水定容至1L。

3.根据权利要求1所述的ABO血型反定型胶体金试剂盒，其特征在于，所述试剂盒为干试剂盒，所述红细胞膜抗原金粒子与基础液干燥在反应孔上。

4.根据权利要求3所述的ABO血型反定型胶体金试剂盒，其特征在于，所述基础液配方如下：

超纯水定容至1L。

5.根据权利要求4所述的ABO血型反定型胶体金试剂盒，其特征在于，所述基础液配方如下：

超纯水定容至1L。

6.根据权利要求1所述的ABO血型反定型胶体金试剂盒，其特征在于，所述反应孔的孔径为13mm~10mm，孔深为1.5mm~3.0mm。

7.根据权利要求1所述的ABO血型反定型胶体金试剂盒，其特征在于，所述反应孔的孔径为13mm，孔深为1.5mm。

8.权利要求1—2任一所述ABO血型反定型胶体金试剂盒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）制备胶体金颗粒溶液：氯金酸在还原剂作用下，聚合成大小为40nm～60nm的胶体金颗粒，所述还原剂为枸橼酸钠、白磷、抗坏血酸、鞣酸中的一种或几种；

（2）制备红细胞膜血型抗原提取物：采用低渗压溶液分别破碎A型红细胞、B型红细胞和O型红细胞，离心弃上清，再超纯水洗涤，离心弃上清，直到上清无色透明，弃上清和底层杂质即为红细胞膜血型抗原提取物，即A红细胞膜抗原、B红细胞膜抗原和O红细胞膜抗原，所述低渗压溶液为0.1%的CaCl₂溶液；

（3）标记：将步骤（1）获得的胶体金颗粒溶液调节pH至5.5~6.5，加入待标记红细胞膜血型抗原提取物反应；

（4）离心：3000r/min离心，弃上清，沉淀即获得红细胞膜抗原金粒子；

（5）复溶：将步骤（4）获得的红细胞膜抗原金粒子复溶于基础液；

（6）反应板亲水处理：用亲水处理液浸渍反应板，其中亲水处理液配方如下：曲拉通X-100：1.0~5.0g，超纯水定容至1L；

（7）分装：将步骤（5）获得的红细胞膜抗原金粒子溶液分装于对应的A、B、O反应孔中，密闭保存。

9.权利要求3—5任一所述ABO血型反定型胶体金试剂盒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）制备胶体金颗粒溶液：氯金酸在还原剂作用下，聚合成大小为40nm～60nm的胶体金颗粒，所述还原剂为枸橼酸钠、白磷、抗坏血酸、鞣酸中的一种或几种；

（2）制备红细胞膜血型抗原提取物：采用低渗压溶液分别破碎A型红细胞、B型红细胞和O型红细胞，离心弃上清，再超纯水洗涤，离心弃上清，直到上清无色透明，弃上清和底层杂质即为红细胞膜血型抗原提取物，即A红细胞膜抗原、B红细胞膜抗原和O红细胞膜抗原，所述低渗压溶液为0.1%的CaCl₂溶液；

（3）标记：将步骤（1）获得的胶体金颗粒溶液调节pH至5.5~6.5，加入待标记红细胞膜血型抗原提取物反应；

（4）离心：3000r/min离心，弃上清，沉淀即获得红细胞膜抗原金粒子；

（5）复溶：将步骤（4）获得的红细胞膜抗原金粒子复溶于基础液；

（6）反应板亲水处理：用亲水处理液浸渍反应板，其中亲水处理液配方如下：曲拉通X-100：1.0~5.0g，超纯水定容至1L；

（7）分装：将步骤（5）获得的红细胞膜抗原金粒子溶液分装于对应的A、B、O反应孔中；

（8）干燥保存：将步骤（7）获得的反应板进行干燥处理，所述干燥为冷冻干燥、抽湿机抽干或烘干，将干燥后的包被有红细胞膜抗原金粒子溶液的反应板封装于铝箔袋内保存。