[发明专利]穿刺活检组织芯片

说明书

技术领域

本发明属于生物芯片领域，涉及一种用于制备微阵列穿刺活检组织芯片的生物芯片及制备方法。 

背景技术

生物芯片是指包被在硅片、尼龙膜等固相支持物上的高密度组织、细胞、蛋白质、核酸、糖类以及其他生物组分的高通量微阵列。利用高通量生物芯片，通过特异性分子杂交及染色技术，对受检样本进行检测，可准确、快速获取大量的分子检测信息。目前已广泛应用于生命科学研究、临床医学分子诊断、以及生物抗体靶向药物筛查和验证等领域。 

穿刺活检组织病理学检查，已成为临床病理学诊断常规检查方法之一。穿刺活检组织直径一般在约1.0mm~2.0mm之间，组织条常规固定、脱水包埋、石蜡切片病理诊断后，所剩余组织量更少。如果后续因为研究需要继续常规石蜡切片，剩余组织很容易消耗完。为了提高临床穿刺活检组织病理学检查后剩余组织样本的使用效率，发明了一种高通量的穿刺活检组织芯片的制备技术与方法。 

目前尚没有利用穿刺活检组织制备组织芯片的技术及应用的专利和文献报道。 

发明内容

本发明旨在提供一种制备高通量的穿刺活检组织芯片的技术与方法。所制备的穿刺活检组织芯片可用于相关疾病的免疫组化、原位杂交等分子医学研究。 

本发明通过以下技术方案实现发明目的。收集42例经乳腺穿刺活检组织病理学检查确诊为乳腺癌的患者的穿刺活检剩余石蜡组织标本，以相应的常规病理HE染色切片为指引，切取HE染色切片癌灶部分对应的石蜡组织条段（1mm-4mm），制备石蜡组织芯，利用组织芯片仪制备乳腺癌穿刺活检组织阵列，石蜡切片制备乳腺癌穿刺活检组织的石蜡组织芯片。 

附图说明

图1是空心阵列石蜡块蜡模的示意图：其中，1：为2例乳腺癌石蜡芯预留的石蜡孔；2：为40例乳腺癌石蜡芯预留的石蜡孔。所有孔径为1.5mm，孔间距为1mm。 

图2是乳腺癌组织阵列石蜡块的示意图：其中，1：为2例乳腺癌石蜡芯柱；2：为40例乳腺癌石蜡芯柱。穿刺活检石蜡组织柱直径为1.5mm，石蜡组织柱间距为1mm。 

图3是穿刺活检石蜡组织芯片的示意图：由于病理诊断石蜡切片，穿刺活检石蜡组织柱纵向已被部分切片切除，组织柱横向截面成为部分的圆面状。其中，1：为2例乳腺癌石蜡芯片组织点，同时也可作为本穿刺活检石蜡组织芯片的定位判断位点；2：为40例乳腺癌石蜡芯片组织点。穿刺活检石蜡组织芯片组织点的直径为1.5mm，乳腺癌石蜡芯片组织点间距为1mm。3：为精子芯片固相载体（粘附载玻片）上的磨沙标记区域。 

具体实施方式

实施例：收集42例经乳腺穿刺活检组织病理学检查确诊为乳腺癌的患者的穿刺活检剩余石蜡组织标本，制备乳腺癌穿刺活检组织的石蜡组织芯片。 

1.1病理诊断：乳腺穿刺活检组织条经过常规病理固定、脱水包埋、石蜡切片染色后，进行病理诊断。 

1.2标本挑选：选择42例乳腺穿刺活检病理诊断确诊为乳腺癌的石蜡组织切片，标记HE染色切片上乳腺癌病灶的区域（>1mm）作为组织芯片制备的目标组织条。 

1.3石蜡芯制备：以HE染色切片上乳腺癌病灶的区域的标记为指引，用石蜡切片刀将相应的石蜡组织块 中的穿刺组织条切断，切取组织条长度为1mm-4mm。将石蜡组织块放于70℃预热的金属加热盘上（石蜡块切片面朝下），加热石蜡组织块切片面约1分钟，至石蜡组织块浅表石蜡部分融化，用镊子小心取下乳腺癌病灶目标石蜡组织条。将目标石蜡组织条放于金属加热盘上继续加热至组织条石蜡完全融化。小心将融化的石蜡组织条纵向放入自制的直径为1.5mm的塑料小管中（70℃预热）。将装有目标石蜡组织条的塑料小管整体水平放入少量融化的石蜡中，以便塑料小管内浸满石蜡。将塑料小管取出置于4℃冷台上快速冷却。肉眼对光观察可清晰看见塑料小管内组织条所在的位置，并用记号笔标记组织条两端的位置。用石蜡切片刀在组织条两端标记处切断塑料小管，小心纵向切开塑料小管（注意尽量不要切到组织条），取出石蜡组织条，即为：石蜡芯。 

1.4受体蜡模：制备空白石蜡块，利用组织芯片制备仪定位钻取孔径为1.5mm的空心受体蜡模，如附图1。 

1.5组织阵列：依照乳腺癌穿刺活检组织的石蜡组织芯片的设计，将总共42例石蜡芯逐一安放到空心受体蜡模中相应的空白孔位点，以阵列表面齐平为基准，如附图2。 

1.6阵列融合：将组织阵列置于干燥箱中，调节干燥箱温度与时间，确保所有组织石蜡芯与受体蜡模充分融合且石蜡芯不移位变形。