[发明专利]一种以碱蓬为原料制备生物乙醇的方法

权利要求书

1.一种以碱蓬为原料制备生物乙醇的方法，其特征在于具体步骤如下：

（1）碱蓬杆的前处理：收集秋季碱蓬枯杆，去杂、干燥后，将碱蓬杆进行粉碎处理；

（2）碱蓬杆的预处理：将经步骤（1）处理后的碱蓬杆与浓度为0.5%～1.0%（w/w）的氢氧化钠溶液以1:8～1:25（g/ml）的料液比，在100℃～115℃处理10min～30min；

（3）碱蓬杆发酵培养基的制备：将（2）预处理后的碱蓬杆料液ph值调为4.5～5.5，并添加至终浓度(w/v)为0.3%的酵母粉,0.5%的蛋白胨，0.02%的尿素，0.4%的硫酸镁，0.01%磷酸氢二铵；

（4）同步糖化发酵制备乙醇：

①应用常温纤维素酶在步骤（3）制备好的发酵培养基中接入质量比8%的高活性酿酒酵母，以15u/g～25u/g量添加常温纤维素酶，在34±2℃、110～150rpm发酵24～72h；

或②应用低温纤维素酶在步骤（3）制备好的发酵培养基中接入质量比8%的高活性酿酒酵母，以15u/g～25u/g量添加低温纤维素酶的粗酶液，在34±2℃、110～150rpm发酵24～72h；

或③低温酶与常温酶联合复配应用在步骤（3）制备好的发酵培养基中接入质量比8%的高活性酿酒酵母，以总酶活为15u/g～25u/g的量按一定比例添加常温纤维素酶和低温纤维素酶的粗酶液，在34±2℃、110～150rpm发酵24～72h；

（5）检测步骤（4）获得的发酵液中乙醇含量，并将其蒸馏得到高纯度生物乙醇；

所述的低温纤维素酶是由从南极土样中筛选出来的南极低温菌株QP7产生，该菌株的保藏地：中国典型培养物保藏中心，保藏号CCTCC NO:M2012257。

2.根据权利要求3所述的一种以碱蓬为原料制备生物乙醇的方法，其特征在于所述的步骤（4）中低温酶与常温酶联合复配应用时常温纤维素酶和上述方法制备的低温纤维素酶的粗酶液分别以酶活量2:1比例添加。

3.根据权利要求1或2所述的一种以碱蓬为原料制备生物乙醇的方法，其特征在于所述的低温纤维素酶粗酶液的制备方法为①将实验室保存的从南极土样中筛选出来的南极低温菌株QP7接种活化，②将①活化后的种子液以质量比5%的量接种于麸皮产酶培养基中，在低温摇床上150rpm，14-16℃培养3-5天；③将②培养好的QP7产酶培养基进行高速离心，离心液即作为低温纤维素酶的粗酶液，并测定酶活。

4.根据权利要求3所述的一种以碱蓬为原料制备生物乙醇的方法，其特征在于步骤②所述的麸皮产酶培养基的组成为(NH4)₂SO₄0.5%（g/ml），MgSO₄0.02%（g/ml），麸皮3%（g/ml）。